Príprava osteoprogenitornogo štep in vitro

Výskumný zámer: premietať trojrozmerný transplantáciu osteoprogenitorových in vitro.

Materiály a metódy. Vzhľadom k tomu, lešenie rôznych bunkových línií použité vzorky hydroxyapatitu, sklokeramiky, hubovité a kortikálnej demineralizovanej kostnej matrice, biotmate riálu «Osteomatryks» ( «Konektbyofarm», Rusko). bola použitá metóda kultivácie buniek pre izoláciu a expanziu multipotenciální mezenchýmových stromálnych cellss (MMSC) kultúr a perioste odvodených z buniek (PDC). Pred cell`s siatie na nosiči boli MMSC navodiť diferenciáciu na vyvinuté a patentované nami technológií. Použila metóda značenia plazmatické membrány podľa Intravitální farbivami Fluoreccent Green PKH67 a Red PKH26 ( «Sigma», USA) pre zlepšenie vizuálneho pohľadu po umiestnení buniek na scaffold`s plochách. Cytochemické metóda bola použitá pre detekciu aktivity alkalickej fosfatázy s použitím z BCIP / NBT Liquid substrátu systému ( «Sigma», USA).

Výsledky. Za určitých podmienok kultivácie boli MMSC uvedený na osteogénny línie, ktorá bola potvrdená pozitívnym alkalickej fosfatázy farbenie. Histologické príprava pripomína kostného tkaniva.

Závery. Táto technológia umožňuje získanie 3D-osteoprogenitive transplantáciu ex vivo.


Účelom tejto štúdie.

Pre návrh trojrozmerný in vitro osteoprogenitorny štep.

Materiály a metódy.

Ako nosiče rôznych bunkových línií za použitia hydroxyapatitu vzoriek, sklokeramika, demineralizovanej kortexu a špongiózne kostnej matrix, Biomateriál "Osteomatrix" ( "Konektbiofarm", Rusko). Spôsob kultivácia buniek bola použitá pre izoláciu a mierke kultúr multipotentních mezenchýmových stromálnych buniek (MMSC), perioste a progenitorov (PKN). Pred siatie bunky na nosiči bolo vykonané bioosteoinduktsiyu ITC bolo vyvinuté a patentované nás technológií. Pre zlepšenie vizuálne pozorovanie umiestnenie buniek na povrchu používa skafoldov plazmového spôsobu označovania membrána vitálnych farbív RKN67 RKN26 zelená a červená Fluoreccent ( «Sigma», USA). Pre detekciu alkalickej fosfatázy bola použitá cytochemickými metóda s použitím substrátu BCIP / NBT Kvapalný substrát systému ( «Sigma», USA).

výsledok.

ITC za zvláštnych podmienok kultivácie indukovaných osteogénny spôsobom, ktorý bol potvrdený pozitívny farbenie pre alkalickú fosfatázu. Histologicky, liek sa podobá kosti.

zistenie.

Táto technológia umožňuje 3D osteoprogenitorny štep ex vivo.


¹Papadopoulos AG, ²Oksimets VM, ¹Oberemko AV, ²Magomedov YA
¹Štátne inštitúcie "Institute of Emergency a rekonštrukčnej chirurgie. VK Gusak lekárskych vied Ukrajiny "²Výskumný ústav traumatológie a ortopédie z Donecku Národnej Lekárske univerzite. M. Gorkij, Doneck, Ukrajina