Endocrinology proteolytické enzýmy vplyv na metabolickú aktivitu mozgových buniek a neutrofilných leukocytov potkanov albínov
Je známe, že proteolytické enzýmy (trypsín, chymotrypsín, a ďalšie), v niektorých prípadoch majú výrazný protivovospalitelnoedeystvie. V tomto ohľade, relatívne proteasové enzýmy shirokoispolzuyutsya pri liečbe rôznych zápalových ochorení skupiny: priedušiek, gynekologické, stomatologické, opuholevyhprotsessov (2,7,14), rovnako ako v prevencii zápalu v chirurgii (6). Medzitým mechanizmy profylaktické a terapeutické deystviyaproteoliticheskih fermentv zápalové procesy ostayutsyanedostatochno študoval. Väčšina plne osvetlené a úloha literatúry argumentirovanav nekrózy a fibrinolytickej (trombolytickej) účinku proteázy v ich protizápalový účinok (5,6). Avšak v literatúre málo dôkazov o priamom účinku proteázy na metabolicheskuyuaktivnost bunkách.
Práca bola zameraná experimentálna issledovanievliyaniya trypsín a kalikreín na aerobnogookisleniya enzýmovej aktivity v nervových buniek a makrofágov, ktoré hrajú vedúcu prevenciu Rolv zápalu (gematoentsefalicheskiybarer).
Materiály a metódy.
Experimenty sa vykonávali na 61 biele samce potkanov populácie Vistarmassoy 200-250 g Dosiahnuté 10 séria pokusov: 6 radu - kontrola, ktorý študoval dehydrogenázy v leykotsitahi systéme neutrofilov "neurón-neuroglia" mozgaintaktnyh kôra zvierat intraperitoneálnou injekciou 0,85% sodíka rastvorahloristogo inaktivovaný trypsín a kalikreín (39krys) - rada 4 - experimentálne, v ktorom degidrogenazneyrotsitov aktivita študovaná intraperitoneálnou injekciou aktívneho trypsínu a kalikreín, rovnako ako aktivite dehydrogenáz a obsah glykogénu v neytrofilnyhleykotsitah krýs intraperitoneálnou injekciu testovanej aktivnyhfermentov (24 zvierat). Testované látky boli podávané od rascheta50 mikrogramov na 100 g hmotnosti zvieraťa. Štúdium metabolické nervnyhkletok kortexu neutrofilov osuschestvlyalispustya krýs 6 hodín po intraperitoneálnom podaní experimentov skúšobné preparatov.Rezultaty sú uvedené v tabuľkách N1 a N2.
Keď histochemické štúdie objekt izucheniyasluzhil časti mozgu krysy, ktoré bolo prijaté v ľavom peredneytsentralnoy gyrus. Pre histochemické analýzu boli pripravené kriostatnyesrezy 15 mikrónov pri -20oC v mikrotome- kriostateMK-25 obvyklým spôsobom [9]. Mozgová kôra bunky mozgakrys laktátu bola zistená dehydrogenázy, postup glitserofosfatdegidrogenazypo Hess, Scarpelli, Pierce [9] a suktsinatdegidrogenazypo nahlási postup [8]. Aktivita dehydrogenáz posudzovaná pokontsentratsii formazanových granule v častiach objektov. Kontrolspetsifichnosti degidrogenazprovodili histochemického detekciu aktivity na kryostatových rezoch mozgového tkaniva, ktorá inkubirovaliv pracovné roztoky v neprítomnosti špecifického substratovokisleniya ňom. Účtovanie histochemického reakcie za použitia dehydrogenázy osuschestvlyalis cytophotometry pri vlnovej dĺžke 512 nm, zonda0,1 cm priemer, šošovky 40 [1]. Posúdenie čisto chemické reakcie otsenivaliv jednotky absorbancie. Pri stanovení aktivity neutrofilných granulocytov degidrogenazv krvi bielych krýs skúmané aktivnostSDG [15], LDH a pre metódu TPD Hess et al., [8] modifikácie navrhnuté Borisova MA a kol. [3,4]. Cytochemické vyyavlenieglikogena v neutrofilných leukocytoch bola vykonaná podľa metódy opísanej v Hotchkiss-Shabadash [11,13]. Finálny odhad Cytochemické reakcie osuschestvlyalipo princíp Kaplow L. [14]. Polymorfonukleárnych leukocytov v zavisimostiot stupeň aktivity enzýmu bola klasifikovaná:
1 stupeň - v cytoplazme jednotlivých peliet obsiahnutých formazana.Aktivnost enzým zanedbateľný (obrázok 1a).
2 stupeň - formazánový granule zaberajú menej ako polovica tsitoplazmykletok. Táto skupina zahŕňa bunky, ktoré obsahujú malé (prach) obsahuje alebo veľmi svetlo sfarbený difúznou hmotnosť (1b).
3 stupne - vyjadrené inklúzie leukocytov s reakčnými produktmi, ktoré zaberajú viac ako polovicu cytoplazme neutrofilov (Fig.1c).
4 stupne - vyjadrené bunky s dutinky reakčných produktov zaberať celú cytoplazme neutrofilov. Aktivnostfermenta vysoká (ris.1g). Výsledky výskumu štatistík obrabatyvalimetodami variácie.
Výsledky a diskusia.
Intraperitoneálna injekcia krýs spôsobila zvýšenie trypsínu ilikallikreina v neurocytes a buniek neyrogliibolshih hemisféry aktivity enzýmu aerobnogookisleniya - LDH 27,2% (p < 0,001), на 18,2% (р < 0,002)соответственно. Активность ЛДГ в изучаемых клетках больших полушарийголовного мозга под действием трипсина и калликреина снизиласьна 27,8% (p < 0,025) и на 16,3 (р < 0,001) соответственно.Активность ГФД в нейроцитах и клетках нейроглии больших полушарийголовного мозга снизилась на 26,0% (р < 0,01) только под действиемтрипсина. Введение калликреина также вызвало уменьшение данногоцитохимического показателя на 5,3% (р < 0,05).
Výsledky štúdie sú uvedené v tabuľke obobschenyi. N1.
Účinok trypsínu a kalikreín na dehydrogenázy, neuroglia sistemeneyrotsit mozgovej kôry u krýs in vivo (M +/- m).
Lieky krysám na 100 g telesnej hmotnosti | Študoval histochemickými ukazovateľmi | ||
SDG | LDH | TPD | |
1. Intaktné krysy n = 12 | 1,94 +/- 0,05 | 1,46 +/- 0,04 | 1,29 +/- 0,08 |
2. 0,85% roztok chloridu sodného, - 1,5 ml n = 5 | 1,96 +/- 0,25 | 1,46 +/- 0,02 | 1,25 +/- 0,08 |
3. inaktivovaný trypsínu - 50 mikrogramov n = 5 | 1,8 +/- 0,1 | 1,37 +/- 0,01 | 1,31 +/- 0,08 |
4. Inaktivovaný kalikreín - 50 mikrogramov n = 5 | 1,98 +/- 0,08 | 1,54 +/- 0,02 | 1,34 +/- 0,12 |
5. Aktívne trypsín 50 mg n = 5 | 2,29 +/- 0,05 +27,2% ***** | 0,99 +/- 0,15 -27,8% ** | 0,97 +/- 0,02 -26,0% **** |
6. Aktívne kalikreín - 50 mikrogramov n = 5 | 2,34 +/- 0,04 +18,2% **** | 1,29 +/- 0,05 -16,3% ***** | 1,27 +/- 0,05 -5,3% * |
Poznámka: čitateľ - Aktivita degidrogenazv podmienené obvyklé jednotky v menovateli - zmena indexu vo vzťahu k riadiacim protsentahpo. Pre sériu experimentov N3,4 - kontrola yavlyaetsyaseriya N2. Rad N5- série N3. Pre sériu N6 - N4 série. (*) - p < 0,05- (**) - р < 0,025- (***) - р < 0,01- (****)- р < 0,002- (*****) - р < 0,01.
Data-Porovnanie histochemické issledovaniyameta parabolické činnosť mozgových buniek a krvných belyhkrys študoval účinok proteázy identifikovaných rovnaké indikátory napravlennostizuchaemyh. Parenterálne podanie tripsinai kalikreín zvierat v dávke 50 mg na 100 g telesnej hmotnosti spôsobené suschestvennyysdvig systém metabolizmus a neurón-neuroglia a kôra golovnogomozga a neutrofilov voči zvýšenej aeróbne oxidácie vosstanovitelnyhprotsessov, ako je jasne preukázané zvýšením aktivnostiSDG, kľúčového enzýmu pri oxidatívnej fosforylácie. Uchityvayapryamoe kininogenaznoe akcie krvi trypsínom a kalikreín [12], možno predpokladať, že sme identifikovali cytochemickými izmeneniyav bunky kôry mozgovej hemisféry potkana obuslovlenybiologicheskim pôsobenie kinínového, ktorý pravdepodobne pronikayutcherez hematoencefalickou bariérou a stimulovať v nervových tkaniaerobnye redoxných procesov.
Znížená aktivita LDH, kľúčový enzým aerobnogookislitelnogo enzýmu v bunkách mozgu a krvných belyhkrys pôsobením trypsínu naznačuje, že táto fermentpri parenterálne podávanie inhibuje glykolýzu v bunkách so špecificitou razlichnoyfunktsionalnoy.
Je známe, že v porovnaní s väčšinou drugihkletok tela vo všetkých leukocytoch glykolytických prevraschenieuglevodov prevažuje nad oxidačné fosforylácie. Udelnyyves glykolýza je celkom energeticheskihprotsessov [10] viac ako 60%.
Tabuľka 2.
Zmeny aktivita dehydrogenázy a obsahu glykogénu v neytrofilnyhleykotsitah bielych krýs za pôsobenia trypsínu a kalikreín (M +/- m) - (v jednotkách aktivity Kaplow)
séria pokusy | znak expozície | Cytochemické ukazovatele študoval (konvenčných jednotiek.) | |||
SDG | TPD | LDH | glykogén | ||
1. n = 6 | ovládanie | 170,0 +/- 4,0 | 197,0 +/- 2,0 | 195,5 +/- 10,0 | 252,0 +/- 5,0 |
2. n = 6 | soľným roztokom | 171,0 +/- 3,0 | 198,0 +/- 3,0 | 196,5 +/- 5,0 | 257,0 +/- 2,0 |
3. n = 6 | trypsín | 195,0 +/- 3,0 | 164,0 +/- 3,0 | 166,0 +/- 3,0 | 206,0 +/- 4,0 |
4. n = 6 | kalikreín | 209,0 +/- 3,0 | 160,0 +/- 2,0 | 156,0 +/- 1,0 | 212,0 +/- 2,0 |
Poznámka: V každej sérii issledovaniyi použitej kontrole 6 zvierat. Významnosť rozdielov: p < 0,001.
- Parenterálne podávanie nízkych dávok trypsínu horoshoizuchennymi spolu s terapeutickými vlastnosťami, inhibuje anaeróbne energeticheskiyobmen neutrofily inhibuje migráciu leukocytov proces ochagvospaleniya a tým bráni šíreniu vospalitelnogoprotsessa.
- Vplyv malých dávok trypsínu zvyšuje antitripticheskuyu aktivnostgomogenata mozgových hemisfér krysy a má vyrazhennyylechebny protizápalový účinok.
- Malé dávky kalikreín, ako nízkych dávkach trypsínu snizhayutaktivnost LDH a TPD v neutrofilných leukocytov a mozgakrys aktivita homogenátu mozgu stimuliruyutantitripsinoliticheskuyu ktorý umožňuje kalikreín v malých dávkach, rovnako ako trypsín, ktorý sa používa ako protizápalové činidlo.
Referencie
- Agroskin LS Papayan GV Cytophotometry: Zariadenia a metodyanaliza absorpcie svetla buniek. - Leningrad. Science, 1979.- 259 s.
- Baumhakl U.S. Fodemar, Kreychova H. enzým ostryhi chronických zápalových procesov v knihe: systémová enzymoterapia: výskumu a klinickej praxi. Upravené K.Nouza, ZA. Masinovsky, R. Nouza. - Mníchov. - Praha. - 1994. - S. 27-30.
- Borisova MA, Ovcharenko NI, kúpele AS Niektoré supravitalnyesposoby Cytochemické Stanovenie aktivity sukcinátdehydrogenázy laktatdegidrogenazyi krviniek // Lab. business. - 1975.- N 12. - S. 723-725.
- Borisova MA, Ovcharenko NI Shpak SI, a kol. Supravitalnyesposoby Cytochemické stanovenie aktivity alfa-glitserofosfatdegidrogenazyi glukóza-6-fosfátdehydrogenázy v leukocytoch perifericheskoykrovi // Lab. business. - 1983. - N 9. - pp 8-10.
- VF Veselov, VA Protsenko Účinok inhibítorov proteolytických enzýmov uux na vychytávanie kyslíka mozgového tkaniva krýs a eeantitripticheskuyu aktivity // Ukr. Biochem. Zh. - 1981. -N 4. - pp 106-108.
- Wolf, M., K. Liečba Ransberg enzýmy. - Moskva: Mir, 1976.- 233 p.
- Dittmar DF Adnexitis v knihe: Systémová enzymoterapia: Štúdia-Niya klinickej praxe. Editoval K. Nouza, ZA. Masinovsky, P. Nouza. - Mníchov. - Praha. - 1994. - S. 35-36.
- E. Pierce Histochemistry Theoretical and Applied. Moskva: Inostr.liter, 1962.- 962 p ..
- Fedorov NA Normálne krvotvorby a jeho regulácie. - Moskva: Medicine, 1976. - 543 s.
- Shabadash AL Cytologické a Cytochemické predstavleniyao bariérovej mechanizmy v bunkách. Proceedings of the stretnutie v knihe: hist-gematicheskiebarery. - Moskva: Nauka, 1961. - P. 381-394.
- Hamberg U. Vplyvy na kinínového systému proteolýzou inplasma // Proc. Roy. Sol. - London, 1969. - V. 173. - P. 393-406 N 1032.-.
- Hotchkiss R. D. Mikrochemických reakcie resalting v staimingof polysacharidových štruktúr v pevných prípravkoch Yissum // Arch. Biochem. - 1948. - V.16. - P. 131 do 141.
- Kaplow L. a histochemické postup pre lokalizáciu s evacuatingleucocyte zásadité phasphatase činnosť v náteroch krvnej drene // krvi. - 1955. - V.10. - P. 1023-1029.
- Klashka F. Ústne enzimes - nový prístup k cfncer tritment // fórum. - Med. - Verl. - Ges. - 1996. -V.2.- R. 102.
- Quglino D., Hayhol F. acetón fixácie pre cytochemicaldemonstration z dehidrogenase v krvi a kostnej dreni ctlls // Nature.- 1960. -V.1.- S. 85-86.
- Sokolova A. Behandlung des multiplen myeloms mit enzimen // Wzarba Y., Klein M.-W., Miehlke a kol. (Eds.). Sistemischeenzymtherapie. Aktueller stáť a Fortschritte. - MMW MedizinVerlag. - Mníchov. - Nemecko. - 1996.
Lenin Boulevard 5/7
Krymská Medical University
Ústav patologickej fyziológie
odborný asistent katedry - Alexander A. Granovsky
Tel: 0652-29-49-40
E-mail:[Email protected]
- Medzi forte pankreatitída slinivka
- Pankreatické enzýmy pre zápal slinivky brušnej, ktoré lieky vziať?
- Holenzim pankreatitída
- Pankreas a nadváha
- Charakteristika pankreasu
- Pankreatické šťavy a tráviace funkcie, ktorá obsahuje enzýmy?
- Štruktúra gastrínu. Fyziológia pankreatickej sekrécie
- Prípravy lipotropic akcie: pankreatín, lipokain, angiotrofin, padutin
- Funkcie a význam makrofágov
- Vývoj ľudskej pankreatické embryogenézy, morfogeneze
- Reďkev s pankreatitída
- Anatómia, cievne zásobenie a inervácia pankreasu
- Alfa-1-antitrypsín nedostatok, alfa (a) s nízkou molekulovou hmotnosťou antitrypsín inhibítorom…
- Ako liečivá, produkty sú široko využívané, poskytujú smerové vplyv na enzymatické procesy v tele.…
- Chymotrypsín kryštalický (chymotrypsinum crystallisatum). Chymotrypsín je proteolytický enzým tvorí…
- Pantripina (rantrypinum). Prípravok získaný z pankreasu dobytka rogagogo. Lyofilizovaná prášok…
- Nástroje, ktoré pomáhajú odstrániť hlien z dýchacích ciest hrajú dôležitú úlohu pri liečbe rôznych…
- Zdravie encyklopédie, choroba, lieky, lekár, lekáreň, infekcie, súhrny, sex, gynekológia, urológia.
- Výborná lekárska encyklopédie IC nevronet. lieky
- Výborná lekárska encyklopédie IC nevronet. lieky
- Endokrinológia