Kortizolu a nadobličky androgénov v krvi

Polčas rozpadu v plazme kortizolu (60-90 minút), závisí od stupňa väzba na bielkoviny a metabolizmus sadzby.

Väzba plazmových proteínov

Po injekcii do krvného kortizolu a adrenálnej androgény viažu na bielkoviny plazmy. Kortizol interaguje prednostne s kortikosteroidmi viažuci globulín (CBG alebo globulínu) a v menšej miere - s albumínom, pričom androgénov - väčšinou na albumín. Podobné biologicky neaktívne steroidy. Iba aktívny neviazaný, alebo bez ich frakcie. kortizol plazmatické proteíny chráni pred rozkladom a hladkými náhle výkyvy jeho úrovni v epizodické emisií z nadobličiek. Sliny väzobných proteínov chýba, a preto sa hladina kortizolu v ňom odráža koncentráciu forme voľnej v krvi.

Voľný a konjugované kortizol

Bazálna voľné kortizolu podmienky predstavuje asi 10% v plazme, podiel spojený s DRG - asi 75%, a zvyšok - podielu spojeného s albumín. voľný kortizol koncentrácia v plazme je približne 1 ug%, a táto úroveň je aktívna hormón je regulované ACTH.

Kortikosteroidy viažuci globulín (CBG)
DRG (molekulová hmotnosť 50000), získaný v pečeni a má vysokú afinitu k kortizolu. Obsiahnutých v 100 ml DRG plazme sa viaže približne 25 ug kortizolu. Keď je celková koncentrácia kortizolu v plazme vyššie ako toto množstvo, koncentrácia jeho voľnej forme sa rýchlo zvyšuje. Ďalšie endogénne steroidy zvyčajne neovplyvňujú väzbu kortizolu CBG. Výnimkou je progesterón v neskorej fáze tehotenstva, kedy to môže trvať až 25% väzobných miest GSB. Syntetické steroidy (okrem prednizolón) s GSB sotva komunikovať. Estrogény zvyšujú hladinu DRG v plazme (ako bolo pozorované v priebehu tehotenstva alebo užívanie perorálnej antikoncepcie). Jeho koncentrácia sa zvyšuje aj hypertyreóza, diabetes mellitus, niektorých ochorení krvi alebo v dôsledku genetických dôvodov. Zníženie DRG charakteristiku jeho deficitu rodiny, hypotyreóza a deficit proteínu (závažné ochorenie pečene alebo nefrotický syndróm).

bielkovina
albumín kapacita kortizolu je oveľa vyššia, ale afinita - nižšie. Za normálnych okolností, albumín sa viaže približne 15% z kortizolu prítomného v krvi, ale v prípadoch, keď je celková koncentrácia väzobnej kapacity kortizolu než DRG, podiel kortizolu viazaný k zvýšeniu albumínu. Albumín viaže aktívny syntetické glukokortikoidy (napr., Asi 75% deksametozona plazma sa viaže na albumín forme).

väzba androgénov
Androsténdión, DHEA a DHEA-sulfát cirkulujú v krvi, sa viaže na albumín voľnú väzbou. s vysokou afinitou Testosterón interaguje s ďalšími globulín viažuci pohlavné hormóny (SHBG).

laboratórne nálezy

Existujú špecifické metódy na stanovenie kortizolu a adrenálnych androgénov v plazme. Aktivita kôry nadobličiek môže byť posudzovaná podľa úrovne steroidov v moči (najmä denné vylučovanie kortizolu). Užitočné informácie definuje koncentráciu ACTH v plazme. Výsledky stanovenia celkovej úrovne steroidných hormónov v plazme závisí od koncentrácie väzobných proteínov. Okrem toho, pretože koncentrácia ACTH a hormónov nadobličiek v plazme významne kolíše počas dňa, sú výsledky jednotlivých definíciách sú veľmi nespoľahlivé. Pre získanie diagnostických informácií adezhnoy bežne používané dynamickej skúške (stimulácia alebo supresívny) a sekrécia rýchlosť ukazovatele kortizolu.

Koncentrácia ACTH v plazme

metódy na stanovenie
ACTH koncentrácia v plazme - veľmi presným indikátorom stavu osi HPA osi. Pri určovaní citlivé imunochemická metóda normálne pohybuje v rozmedzí od 9-52 pg / ml (2-11,1 pmol / l).

interpretácia
Stanovenie hladín ACTH v plazme sa často vykonávajú za účelom stanovenia lokalizácie primárnych príčin nadobličiek dysfunkcie.

1. V primárnej úrovni nedostatočnosť nadobličiek ACTH zvýšili a na hypofyzárnej patológie a sekundárne nedostatočnosti nadobličiek úroveň jeho "normálne", alebo nedosiahne 10 pg / ml (2,2 pmol / l).
2. V Cushingovho syndrómu, adrenálnej nádoru podmienené kortizolprodutsiruyuschey, má diagnostické pokles významnosti plazmatických hladín ACTH pod 5 pg / ml (1,1 pmol / l), zatiaľ čo pre Cushingoidné chorobu (ACTH hypersekrécia) z jeho hladinou v plazme je normálne alebo zvýšené.
3. hladina ACTH v plazme sa obvykle výrazne zvýšil syndrómu ektopické sekrécie ACTH, aj keď ako významné zvýšenie jej spoločný a Cushingovho choroba. Okrem toho, pri použití imunoradiometrický metódy dvojitej protilátky (IRMA) ACTH v ojedinelých prípadoch tohto syndrómu je zvýšená v menšej miere, pretože táto metóda nedefinuje ACTH makromolekulárnej prekurzory.
4. hladina ACTH v plazme a výrazne zvýšená u pacientov s bežných foriem kongenitálna adrenálna hyperplázia, ktorá sa používa pre diagnózu týchto porúch a sledovanie ich liečbu.

koncentrácie kortizolu v plazme

metódy na stanovenie
Hladiny kortizolu v plazme je najčastejšie stanovená metódami radioimunotestem (RIA) alebo vysoko účinnou kvapalinovou chromatografiou (HPLC). Tieto metódy plazmového kortizolu určené spolu (viazané a voľné). Sliny rovnako obsahuje iba voľný kortizol a analýza slín umožňuje jednoduchý a spoľahlivý posúdiť koncentráciu voľnej forme hormónu.
Princíp RIA je na inhibíciu väzby značených kortizolu kortizolu protilátok prítomných vo vzorke plazmy. Citlivosť moderných metód RIA umožňuje použitie malých objemov plazmy. Okrem toho v súčasnej dobe používajú antiséra ťažko interakcii s inými endogénne steroidy, a preto výsledky RIA presne odrážať obsah celkového kortizolu v plazme. Použiteľné protilátky môžu krížovo reagovať s niektorými syntetickými glukokortikoidmi (napr. Prednison), ale aj ďalšie bežne používané látky neovplyvňujú výsledky týchto stanovení.

interpretácia
Jeden stanovenie koncentrácie kortizolu v plazme zbavený diagnostický význam, ako je epizodický kortizol sekretovaný a navyše jeho zvýšenie úrovne pre stresu. Spoľahlivejšie informácie získané dynamickú HPA systém testovania stavu.

1. Normálnej hladiny. Normálne plazmatické hladiny kortizolu závisí na definíciu metódy. Podľa RIA, kortizolu obsahu v 8 hodín v rozmedzí od 3 do 20 mg% (80-550 nmol / l), v priemere 10-12% g (275,9-331,1 nmol / l). Neskôr, sú tieto hodnoty znížia hodiny a v 4 hodiny ráno o pol. V rozmedzí od 10 hodín a koncentrácia 2 hod kortizolu je zvyčajne menší ako 3% ug (80 nmol / l). hladiny kortizolu v slinách polnoci je nižšia ako 0,15 g% (4 nmol / l).
2. Hladiny v období stresu. Kortizol zvyšuje sekréciu v rôznych ochorení, počas chirurgického zákroku a trauma. Za týchto podmienok je koncentrácia kortizolu v plazme môže dosiahnuť 40-60 mg% (1100-1655 nmol / l).
3. Zvýšená koncentrácia estrogénu. Celková hladina kortizolu v plazme sa zvyšuje so zvyšujúcou sa väzbovej kapacity DRG, ktoré sa často vyskytuje v vysokým obsahom estrogénu v krvi (napr., V priebehu tehotenstva alebo použitie exogénnych estrogénov alebo perorálnej antikoncepcie). Koncentrácia kortizolu v takýchto prípadoch je 2-3 krát väčšia, než je obvyklé.
4. Iný štát. Obsah DRG sa môže líšiť v závislosti na ďalších podmienkach. Celkovo sa zvyšuje koncentrácia kortizolu v úzkostných a depresívnych stavov, v hladovanie, mentálna anorexia, alkoholizmus a chronické zlyhanie obličiek.

Kortizolu v slinách v neskorých nočných hodinách

Väčšina pacientov s Cushingovým syndrómom narušená cirkadiánní rytmus sekrécie kortizolu, a jeho úroveň (na rozdiel od normy) nie je znížený na 11-12 hodín v noci. To môže narušiť spánok a môže viesť k psychickým problémom. Zvýšené hladiny kortizolu v plazme o polnoci (na spiace ľudí) rysy Cushingovho syndrómu je nielen normou, ale aj z podmienok, ako je depresia alebo alkoholizmu. Podľa jednej štúdie, sérové ​​koncentrácie kortizolu polnoci vyššie ako 5,2 mg% (140 nmol / l), pre diagnostiku Cushingov syndróm so 100% citlivosťou a 77% špecifickosť. Avšak, táto definícia je ťažké, a mnohí lekári radšej k diagnóze Cushingovho syndrómu, hladiny kortizolu v slinách v noci. obsah kortizolu v slinách, je v rovnováhe s bez kortizolu hladinou v krvi nezávisí od množstva slín a zostáva stabilný po dobu niekoľkých dní.
Využívajúce rôzne nástroje zbierať sliny ľahko doma. Nedávne štúdie ukázali, že zvýšené hladiny kortizolu v slinách v noci je spoľahlivým znakom Cushingovým syndrómom. Citlivosť a špecifickosť tohto indexu presahuje 90%, a takéto stanovenie môže byť najviac jednoduchý a účinný spôsob skríningu pacientov s podozrením na hypercortisolemia. Referenčné hodnoty koncentrácie kortizolu v slinách sú závislé na definíciu metódy.

} {Modul direkt4

Kortikosteroidy v moči

voľný kortizol

1. Metódy stanovenia. Stanovenie močového voľného kortizolu v moči - spoľahlivý spôsob pre diagnostiku Cushingovho syndrómu. Zvyčajne bez kortizol v moči je menej ako 1% z vylučované hormónu. Avšak, keď je nadmerná sekrécia kortizolu koncentrácia presahuje väzbovej kapacity DRG, a úroveň voľného hormónu v plazme, a jeho vylučovanie zvýšil. Obsah voľného kortizolu stanovená denne vzorky moču pomocou HPLC, RIA, a v poslednej dobe, pomocou plynovej chromatografie / hmotnostnej spektrometrie.
2. Normálnej hladiny. V súčasnej dobe sa najviac špecifická metóda pre stanovenie kortizolu v moči je HPLC. Normálne hladiny voľného kortizolu určená týmto spôsobom, sa pohybuje v rozmedzí od 5 do 50 mikrogramov (14 až 135 nmol) za deň. Pri použití RIA techniky normálne kortizolu v moči je 20-90 mikrogramov (50-250 nmol) za deň.
3. Diagnostický význam. Moč ľahko odlíšiť od Cushingovým syndrómom obezity, pretože obsah voľného kortizolu v moči (na rozdiel od 17-gidroksikorti kosteroidov) nezvýši v obezite. Hladiny kortizolu v moči sa zvyšuje za rovnakých podmienok ako jeho obsahu v plazme, a môže zvýšiť trochu počas tehotenstva. Keď nedostatočnosť nadobličiek, ako spôsob, ako posúdiť sekréciu kortizolu neplatí, vďaka nízkej citlivosti tejto metódy, a pretože nízky kortizolu močom je charakteristické pre mnoho zdravých ľudí.

17 Gidroksikortikosteroidy
V súčasnej dobe, definície vylučovanie týchto látok v moči stratila svoj význam, pretože bolo možné stanoviť hladiny kortizolu v plazme a voľný kortizolu v moči.

Potláčajúce vzorky s dexametazónom

Vzorka s najnižšou dávkou
Pomocou tohto testu môžete odmietnuť alebo potvrdiť diagnózu Cushingovým syndrómom, bez ohľadu na jeho príčinu. Za normálnych okolností, dexametazón, že aktívny glukokortikoid, potláča sekréciu hypofyzárneho ACTH, čo vedie k poklesu hladín glukokortikoidov v plazme a moči. Tak kontroluje bezpečnosť mechanizmu spätnej väzby osi HPA. Cushingov syndróm Tento mechanizmus je prerušené, a sekrécia steroidov dexametazónu nezníži. Dexametazón pri dávkach použitých neruší stanovenie kortizolu v plazme a moči.
Pre skríning pacientov s Cushingovým syndrómom sa zvyčajne vykonáva stanovenie cez noc s 1 mg dexametazónu. Dexametazón sa podáva do 11 hodín a hladina kortizolu v plazme je určená v dopoludňajších hodinách. Ak je jeho hladina je nižšia ako 1,8 mg% (50 nmol / l), v Cushingov syndróm, je pravdepodobné, že bude vylúčené. Ak je hladina kortizolu vyššia ako 10 mg% (276 nmol / l), potom (v neprítomnosti dôvodov falošne pozitívnych vzoriek), znamená to, že prítomnosť syndrómu. V týchto prípadoch by sa mala diagnóza potvrdená inými prostriedkami. hladiny kortizolu medzi 1,8% a 10 ug uninformative.
Správa o odpoveď na dexametazón sa nachádza vo výkone 80-99% pacientov s Cushingovým syndrómom. Falošne negatívne výsledky tejto štúdie sú bežnejšie v jemnej hypercortisolemia, ako aj v prípade pomalého metabolizmu dexametazón, kedy koncentrácia v plazme vyššia ako očakávaná. V takých prípadoch, plazma zároveň stanoviť obsah dexametazón a hydrokortizón.
Falošne pozitívne výsledky sú časté u hospitalizovaných pacientov a pacientov s chronickým alebo akútnym ochorením, rovnako ako depresie a úzkosti, alkoholizmus, vysoká hladina estrogénu a urémia. Pacienti užívajúci fenytoín, barbituráty a ďalšie činidlá, ktoré indukujú syntézu mikrozomálnych pečeňových enzýmov, dexametazón môže rozpadať rýchlejšie, a nedosiahne koncentrácia potrebná na zníženie hladiny ACTH.

Vzorka vysoké dávky
Tieto testy sa vykonávajú rozlišovať Cushingovho choroba (hypersekrécia ACTH hypofýzou) syndróm ektopickej sekrécie ACTH a nadobličiek nádorov, pretože v prvom prípade superphysiological dávky dexametazónu môže ešte inhibovať sekréciu ACTH a kortizolu, zatiaľ čo v nadobličiek nádorov a vo väčšine prípadov, ektopická sekrécia ACTH, že sa tak nestane. Bohužiaľ, veľmi často existujú výnimky z tohto pravidla, ktorá vyžaduje veľkú opatrnosť pri interpretácii výsledkov týchto vzoriek.

1. Krátky test s vysokými dávkami dexametazónu. Vopred určený počiatočná koncentrácia ráno kortizolu v plazme. V 11 hodín potravu získa 8 mg dexametazónu a hladiny kortizolu v plazme boli stanovené v 8 hodín ráno. Pri ochorení koncentráciu kortizolu Cushingovho v plazme ako pravidlo, že je menšia ako polovica pôvodnej jeden, a v syndróme ektopické sekrécie ACTH, alebo nie je znížený, alebo sa redukuje na v oveľa menšej miere. Koncentrácia kortizolu v plazme sa nezníži a adrenálnej nádory, ktoré vylučujú kortizolu samostatne. V týchto prípadoch, sekrécia ACTH sa potlačia už spočiatku vysoké hladiny endogénneho kortizolu, dexametazón a efekt sa nezobrazí.
2. Dlhé vzorka s vysokou dávkou dexametazónu. Dexametazón prehltnúť 2 mg každých 6 hodín počas 2 dní. Pred a druhý deň po začatí dexametazónu dennej moču boli zhromaždené. V Cushingovho choroba kortizol vylučovania je znížená o viac ako 50%, zatiaľ čo u nadobličiek nádory alebo ektopickej sekrécia ACTH zostáva prakticky na začiatku. Avšak u niektorých pacientov so syndrómom ektopickej sekrécie ACTH vysokými dávkami dexametazónu napriek tomu znižovať vylučovanie kortizolu a, v niektorých prípadoch, vylučovanie Cushingoidné choroba hormónu je znížená v oveľa menšej miere. Diagnostická senzitivita, špecificita a presnosť výsledkov tohto testu je len asi 80%. Zvýšiť svoju špecifickosť a presnosť, ako je to možné, sa zamerať nie na kortizolu vylučovanie a ďalších kritérií. Avšak, stále viac a viac zrejmé, že vzorka s vysokými dávkami dexametazónu bráni s istotou odlíšiť hypofýzy ACTH hypersekréciou negipofizarnoy, bez ohľadu na kritériá pre vyhodnotenie jeho výsledkov.

HPA osi rezerva

Stanovenie hypofýzy a nadobličiek rezervy sa používa na posúdenie schopnosti HPA systému reagovať na stres. Z tohto podávaného ACTH (ktorý priamo stimuluje sekréciu kortikosteroidov) metirapon (ktorá inhibuje syntézu kortizolu, a tým stimuluje sekréciu ACTH), alebo inzulínu (ktorý spôsobuje hypoglykémiu, stimuluje sekréciu CRH a teda ACTH). Neskôr pre priamu stimuláciu sekrécie hypofyzárneho ACTH kortikotrofami začala uplatňovať KRG.

ACTH Vzorky

1. Metodika a normálne hodnoty. Krátky ACTH stimulačný test umožňuje vyhodnotiť akútnej adrenálnej reakcia na stimuláciu sa vykonáva pre diagnostiku primárne i sekundárne nedostatočnosti nadobličiek. syntetický ^1-24 Ľudský ACTH (tetrakozaktid alebo kosintropin). Pôst pred skúškou voliteľné a možno vykonať kedykoľvek počas dňa. Po stanovení základnej kortizolu intramuskulárne alebo intravenózne v dávke 0,25 mg tetrakozaktidom a stanoviť obsah kortizolu v plazme po 30 alebo 60 minút po injekcii. Vzhľadom k tomu, maximálna koncentrácia ACTH vo vzorke je väčšia ako 10000 pg / ml, z toho vzorky odráža maximálnu sekrečnú kapacity kôry nadobličiek. Maximálne zvýšenie hladiny kortizolu po 30-60 minút by prekročiť 18-20 mg% (497 až 552 nmol / l). Tento nárast v 30. minúte je konštantná a nezávisí na bazálnej koncentrácie kortizolu. Okrem toho, že nie je závislé na tom, či je ACTH podáva v dávke 250, 5, alebo dokonca 1 mg. Vzostup hladiny kortizolu v reakcii na podanie 1 mg ACTH je citlivejším indikátorom adrenokortikálnej funkcie a umožňuje zvoliť medzi prijímajúce dlhodobej liečby kortikosteroidmi, u pacientov, ktorých reakcia na 250 mikrogramov ACTH normálne, ale 1 ug - oslabená. Vzorka s 1 ug ACTH lepšie tolerovaný, a zdá sa, že je metódou voľby pre podozrenie na adrenálnej insuficiencie. Na trhu nemusia byť menej informatívne stanovenie kortizolu v slinách po podaní ACTH.
2. Znížená odpoveď. Slabá nadobličiek odpoveď na akútne stimulácie potvrdzuje diagnózu nedostatočnosti nadobličiek. Pri výpadku primárneho adrenokortikálna sekrécie kortizolu zníženie a zvýšenie sekrécie ACTH. Preto nadobličky najprv stimulované v čo najväčšej miere, a podávanie exogénne ACTH nezvyšuje sekréciu kortizolu. Inými slovami, v tomto prípade dochádza k redukcii v nadobličiek sekrečnú rezerv. Na sekundárnej nedostatočnosti nadobličiek (kvôli nedostatku ACTH) a čisté zóny lúčov kortexu atrofia a v podstate necitlivý k akútnej ACTH stimulácii. Rovnako ako v prípade primárneho a sekundárneho zlyhania pri adrenokortikálna ich zoslabený odpoveď na akútne ACTH stimulácie umožňuje očakávanú útlmu odpoveď na inzulín hypoglykémie, metyrapone a chirurgické stresu.
3. Normálna reakcia. Normálna odpoveď na akútne ACTH stimulácie eliminuje ako primárny adrenálna nedostatočnosť (ako o tom svedčí zachovanie týchto rezerva sekrečných žliaz), a jasnú sekundárne adrenálna nedostatočnosť (vzhľadom k ich atrofia). Avšak reakcie nevylučuje normálnu čiastkové nedostatok ACTH (hypofýzy zníženie rezervy), pretože bazálny sekrécia tropické hormónu môže byť dostatočné, aby sa zabránilo atrofia nadobličiek, ale nebude rásť pod tlakom. V takýchto prípadoch sa vzorky zobrazené s metyrapone, inzulínu alebo hypoglykémie AWG.

Test s metyrapone
Vzorka sa metyrapone použité pre diagnostiku poruchy nadobličiek a posúdiť HPA osi rezervy. Metyrapone blokuje syntézu kortizolu, inhibícia LLP-hydroxylázu, ktorý prevádza 11-deoxykortizolu na kortizol. To stimuluje sekréciu ACTH, čo na oplátku zvyšuje sekréciu 11-deoxykortizolu a jeho hladinou v plazme. Ak máte podozrenie, že nedostatok hypofyzárneho ACTH sa bežne používa krátky dexametazónu test. Podozrenie na primárnej nedostatočnosti nadobličiek lepšie overiť s krátkym testom s ACTH. Vzorkovacia frekvencia v noci s metyrapone úrovňou 11-deoxykortizolu v plazme by mali byť väčšia ako 7% ng (0,2 nmol / l), a ACTH - 100 pg / ml (22 pmol / l). Znížená odpoveď označuje poruchu kôry nadobličiek. Normálna reakcia na metyrapone umožňuje predvídať normálnu reakciu na stres a inzulín ruky hypoglykémie.

Test s inzulínom hypoglykémie
Napätie vyvolané hypoglykémia, sprevádzané uvoľnením AWG, čo vedie k zvýšenej sekrécii ACTH a kortizolu. Za použitia tejto štúdie hodnotila funkčnej integritu systémov HPA a jeho schopnosť reagovať na stres. Za normálnych okolností, zvýšenie hladiny kortizolu v plazme by mali byť väčšia ako 8% (220 nmol / l) mikrogramov, a jeho maximálna koncentrácia - 18 až 20 mg% (497 až 552 nmol / l). Plazmatické hladiny ACTH v reakcii na hypoglykémiu sa obyčajne vzrástla o viac ako 100 pg / ml (22 pmol / l). Normálny nadobličiek odpoveď kortizolu vylučuje zlyhania a k zníženiu hypofýzy ACTH rezervy. To znamená, že ľudia s normálnou reakciu na hypoglykémiu nepotrebuje ďalšie množstvo kortizolu v čase choroby alebo chirurgického zákroku.

Vzorka s KRG
ACTH reakcia na CRH vystužené primárnej insuficiencii nadobličiek a off-line, kedy gipopitui-tarizme. V patologických procesov v hypotalame, táto reakcia môže byť odložené. Vzorka sa KRG je takisto vykonávať na určenie príčiny Cushingovho syndrómu.

androgény
sekrécia androgénu zvyčajne hodnotené na ich základnej úrovni ako potlačujúci a vzorka stimulácia je v tomto prípade menej informatívny než za porušenie glukokortikoidy sekrécie. Existujú metódy na stanovenie DHEA, DHEA-sulfát, androstendiónu, testosterónu a dihydrotestosterónu. hladina voľného testosterónu v plazme priamo odráža jej biologickú aktivitu, ale komerčných kitov pre jeho definíciu nie vždy dať presné výsledky.