Onkologiya-

KP Hanson

Oncology Institute. prof. NN Petrov, Ministerstvo zdravotníctva, St.-Petersburg

zdroj RosOncoWeb.Ru

Oncogene ErbB2 (HER2 / neu) je v druhej polohe po supressornogogena p53 v počte publikácií venovaných jednotlivé geneticheskomuelementu. Takáto situácia je pochopiteľné, pretože ErbB2 gén yavlyaetsyaidealnym príklad pre preukázanie úspechu molekulárnej onkológie pochopenie základných mechanizmov rakoviny, a vrazrabotke zásadne nové diagnostické metódy onkologicheskihzabolevany a konečne zistenie patogenetický podhodovk nádorové terapiu. Je nevyhnutné, aby prakticheskoeprimenenie znalosť onkogénu obavy ErbB2 onkologicheskogozabolevaniya najčastejšie u žien - rakoviny prsníka (BC) (Imyanitov Knyazev, 1991- Yu, Hung, 2000).

Gene ErbB2 (HER2 / neu) je bunkový homológov v-ErbB onkogenavirusa eritroblastomy vtákov. Jeho veľkosť je 4,5 kb mRNA kódované informácie v ňom pre syntézu proteínu P185 (1225 aminokyselín) .Do proteín má 44% homológie s receptorom rastového epidermalnogofaktora (EGF) (Coussens et al., 1985). Široká izvestnostgen ErbB2 získané po zverejnení, ktorá bola inštalovaná iba v skutočnosti jeho aktiváciu v nádoroch prsníka, Noi argumenty v prospech združení ErbB2 amplifikačních splohim prognózou (Slamonovi a kol., 1987). Blagodaryadannoy a rad ďalších publikácií, klinický výskum aspektovaktivatsii ErbB2 vrátane mnohých vedeckých skupín, s tisícov pacientov podstúpilo etomtestirovaniyu (Piccart et al., 2000) .V Naše laboratórium je tiež schopná preukázať osnovnyezakonomernosti aktiváciu ErbB2 génu v ľudských nádoroch, kotoryi ďalej potvrdený, keď združená analýza mezhlaboratornyhdannyh (Imyanitov, Prince, 1991 Imyanitov et al., 1992- Imyanitovet al., 1992, 1993- Knyazev et al., 1992).

V súčasnej dobe je hlavným cieľom výskumníkov sosredotochenona klinického použitia monoklonálnych protilátok (mAb) pre genuERBB2 (Herceptin) a hľadanie sľubné nové fondy vozdeystviyana jeho patologickú aktiváciou najmä u rakoviny prsníka (Baselga, 2001- Yu, Hung, 2000).

Molekulárne mechanizmy aktivácia génu ErbB2

ErbB2 je členom rodiny tyrozín kinázy ErbB receptora sa skladá zo štyroch funkčne vzájomne prepojené retseptornyhmolekul, ktoré hrajú dôležitú úlohu v bunkovej proliferácie, diferenciácie a apoptózy. Táto rodina zahŕňa rast epidermalnyyfaktor (EGF alebo ErbB 1), ErbB-2, ErbB-3 a ErbB-4. Podľa deystviemligandov ErbB2 tvoria heterodiméry s inými receptormi dannogosemeystva, ktorá má zjavne silnejšie potenciátor effektomna pracovné príslušné signálne dráhy (Harari, Yarden, 2000).

Efekt ErbB2 môže dramaticky zvýšiť, keď gena.Superekspressiya ErbB2 expresia zvyšuje bunkovú tumorigeničnosti v kulturevsledstvie spontánnych fosforylácie heterodiméry obrazuemyhretseptorami a zahŕňajúce príslušné signalizačné dráhy, ako je MAPK a PI3K (Harari, Yarden, 2000). Za normálnych okolností, signály z receptorov sú rýchlo inaktivované v dôsledku komplexy dissotsiatsiiligand-receptor, a degradácii v lyzozómoch. Odnakoeti obranné mechanizmy zlyhať v superekspressiiERBB2 (Klapper a kol., 2000). Osobitné miesto v iniciačným a signalovprinadlezhit ErbB3, as Táto kináza defektné aktivnostiretseptor široko zastúpené vo väčšine epiteliálnych buniek, a jeho koexprese s ErbB2 má vysoko transformiruyuschimpotentsialom.

Bolo zistené, že onkoproteínov ErbB-2 nadmerne exprimovaný v 20-30% nádorov prsníka, a v prípade intraduktálního (neinvazívna) foriem rakoviny prsníka, je táto hodnota dosahuje 90% (Slamonovi a kol., 1987- Knyazevet al., 1992- Imyanitov et al., 1993). Bolo zistené, že ligand-zavisimoyaktivatsii ErbB2 dôležitú úlohu tiež patrí medzi ostatných členov semeystvaetih receptory. Ukázalo sa, že ErbB-1 je v stave obratnoykorrelyatsii s úrovňou estrogénového receptora (ER) a assotsiirovans nepriaznivý priebeh rakoviny prsníka (Harari, Yarden, 1999). V otnosheniisuperekspressii ErbB-3 a ErbB-4, boli získané protichodné výsledky, aj keď určitá tendencia označených korrelyatsiis nádorov pozitívnych a ER-veľkosti stavu (Srinivasan et al., 2000).

Jedným z dôležitých aspektov buniek ErbB2 receptoru akčných je ihsposobnost poskytnúť nezávislosť faktorovrosta majetku. Na záver je potrebné zdôrazniť vzťah medzi superekspressieyERBB2 a úrovňou cyklin D-typu klietky. Aberantne superekspressiyatsiklinov typu D (D1, D2 a D3) aktivuje CDK4 a CDK6, vklyuchaetkletochny cyklus a podporuje karcinogénne transformáciu buniek (Harari, Yarden, 2000).

Prognostický význam aktivácia ErbB-2 onkoproteínov

Napriek existencii rozporov v prvej frekvenčnej rezultatahopredeleniya ErbB2 zosilnenie, do dnešného dňa etisvedeniya sú pomerne playable (Piccart et al., 2000). Ako bolo uvedené vyššie, ErbB2 onkogén aktivácia nablyudaetsyaprimerno v 20-30% rakoviny prsníka. Harder je tomu v prípade posúdenia úrovne ErbB2 génovej ekspressiiprodukta - P185 proteínu. Po prvé, rozsiahle štúdie chislosootvetstvuyuschih vykonané imunohistochemicky, ktorý je semi-kvantitatívnej povahy. Zachastuyupredstavlyaetsya pomerne ťažké rozlíšiť medzi génu patologicheskoyaktivatsiey (prudký nárast jeho expresiu) a "fyziologický"ErbB2 proteín čiastky. Po druhé, väčšina immunogistohimicheskihrabot vykonaná na archívne patologickej srezah- aj keď, teoreticky, taký materiál je ideálnym cieľom dlyaretrospektivnyh štúdie, použitie parafínového blokovsopryazheno s ďalšími technickými ťažkosťami, ako kakdegradatsiya cieľový antigén z dôvodu nedostatočného konservatsiiobraztsov, rôzne citlivosti rôznych protilátok, atď Po tretie, rané diela nie vždy rozlišovať medzi membránou a tsitoplazmaticheskimokrashivaniem ERBB2- zrejme klinický význam predstavlyaettolko receptor proteínu forme (van de Vijver, 2001). Všeobecne platí, že starostlivo vykonané štúdie ukazujú vysoké urovenkonkordantnosti medzi amplifikácie génom erbB2 a ostrým uvelicheniemkolichestva membrány P185 produktu.

Prevažná väčšina vedcov súhlasí s tým, že aktivatsiyaonkogena ErbB2 je spojená so zlou prognózou. Často role poškodenie Zdá sa, ErbB2 sprostredkované, tak kakamplifikatsiya a nadmerné vystavenie tohto génu je vo vzájomnom vzťahu s "klasický"prognostických parametrov, ako je napríklad neskorej fáze ochorenia, metastázy do lymfatických uzlín differentsirovkiopuholi nízkej úrovni, vysokým indexom mitotického, aneuploidních, otsutstvieestrogenovyh receptory, atď Avšak, mnoho ukazyvayuttakzhe práce samy osebe, nezávisle na ďalších faktoroch prognosticheskoeznachenie aktivovaný ErbB2. Základný, že takéto zakonomernostispravedlivy a ruskej pacientov: najmä naše sobstvennyeraboty odhalili silnú koreláciu medzi amplifikáciu ErbB2 opätovného výskytu karcinómu prsníka karamelu (Imyanitov et al, 1992- Imyanitov a kol, 1993).

Je potrebné zdôrazniť, že hoci samotná skutočnosť, prognostický znachimostigena ErbB2 a ďalšie molekulárne markery pre nastoyaschemumomentu Nepochybujem o tom, pri výbere stratégie liečby reshayuscheeznachenie je daná po všetkých tradičných markerov prognózy. Teda ochorenia, informácie o stave ErbB2 môžu byť zapojené iba v zatrudnitelnyhsluchayah a považovať za doplnkové. Najmä štúdie prilákal bolshoevnimanie venovaný významu ERBB2pri čoskoro (najmä non-metastatické) formy rakoviny prsníka. Zistili, že údaje o aktivácii ErbB2 génu môže znamenať neobhodimostiintensifitsirovat pooperačné pozorovanie, a snáď modifitsirovatskhemu liečbu. Ešte zaujímavejšie je otázka ErbB2 amplifikatsiigena neinvazívnej formu rakoviny prsníka. Bolo zistené, že aktivatsiyaERBB2 koreluje s nepriaznivými vlastnosťami rakoviny prsníka in situ, najmä s komedón typu a nízkym stupňom differentsirovki.Odnako, stále zostáva nejasné, či existuje asociácia mezhduamplifikatsiey erbB2 a riziko degenerácie karcinóm in situ karcinómu prsníka vinvazivnuyu forme, tj či sa má brať do úvahy stav objeme ErbB2 privybore chirurgii.

Ďalším dôležitým aspektom tohto problému - prognozirovanieeffektivnosti nádor terapia na základe vyhodnotenia téme ErbB2 statusa.Dannoy predmetom početných štúdií, rezultatykotoryh zďaleka jednoduché. Avšak, hlavný záver svoditsyak, že s vysokou nádorov prsnej žľazy ErbB2 retseptoraokazyvayutsya odolnejšie pre všetky typy protivoopuholevyhvozdeystvy (liečených chemoterapiou a rádioterapiou gomono-) (Mass, 2000).

Techniky pre stanovenie ErbB2

Je vyvinutý celý rad inštruktážnych techník posúdiť ErbB2 statusaopuholey, medzi ktorými existujú techniky vhodné iba dlyaissledovatelskih ciele, rovnako ako tie, ktoré boli použité dennej klinickej praxe (van de Vijver, 2001). V kachestvemolekulyarnyh cieľov v rôznych prípadoch DNA, RNA, proteíny iliretseptornye. Možno považovať za všeobecne uznávané, že väčšina uplatniteľné vo situgibridizatsiya žiarivky (FISH) pre otsenkiamplifikatsii ErbB2 gén. Avšak, nie všetky praktické laboratoriiispolzuyut FISH, a to predovšetkým vzhľadom k jeho zložitosti a dlitelnostivypolneniya. Sauzern- a Northern blot a rôzne prevedenia polimeraznoytsepnoy reakcie, ktoré slúžia k cieľovej DNA a RNA primenyayutpreimuschestvenno na výskumné účely (Dowsett et al., 2000).

V praxi sa až doteraz dominantné prinadlezhitimmunogistohimicheskomu (IHC) definujúce ErbB2. To metodikadostatochno špecifický, rýchlo a ľahko realizovateľné, a je k dispozícii pre väčšinu laboratórií. Vzhľadom na citlivosť IHC zavisitot monoklonálne protilátky použité, sa odporúča pracovať so štandardným naboramiantitel, najmä firmy HercepTestTM "DAKO" (Espinoza, Anguiano, 1999). Je však možné, že automatizácia rybársky aproximačnou PCR postupy na praktické problémy môžu izmenitsituatsiyu, a tieto techniky nahradia menej špecifické IHC.

ErbB2 - cieľová protinádorová liečba

Receptora ErbB2-sa stala v posledných rokoch, je hlavný molekulárnej cieľ, ktorý sa zameriava na hľadanie nových moderných spôsoboch liečby mnohých spôsobmi RMZh.Izvesten špecifické potlačenie ErbB2 činnosti prvé miesto medzi nimi určite patrí do Ica ekstrakletochnomudomenu receptorového proteínu (Yu, Hung, 2000). Spočiatku byloustanovleno, že myší monoklonálne protilátky 4D5 Schopnosť inhibovať rast kletokRMZh so zvýšenou expresiou ErbB2. Avšak myshinyhMKA imunogenicita obmedzená ich klinické využitie (Baselga, 2001). Poetomumyshinye mAb 4D5 bola podrobená postupu z tzv humanizácie, teda soediniliih domény, určujúce komplementárnosť k receptoru erbB2 SG1-ľudského imunoglobulínu. Výsledný mAb objavil vysokoeffektivnymsredstvom potlačenie rastu nádorových buniek a získané shirokuyuizvestnost zvaný droga Herceptin (trastuzumab). Oniproshli detailné predklinické a klinické štúdie a v liečbe metastatického uspeshnoispolzuyutsya ErbB2 pozitívnym karcinómom prsníka (Baselga, 2001). Herceptin má výrazný protivoopuholevoyaktivnostyu podmienky v monoterapii alebo v kombinácii s izvestnymihimiopreparatami (taxány, anthracyklinová antibiotiká iproizvodnymi platiny).

Oveľa menej je doteraz známy aj iné prístupy k modifikatsiiekspressii ErbB2. Tak napríklad, bolo preukázané, vozmozhnostinaktivatsii ErbB2 génu na úrovni transkripcie cez adenovirusnogobelka E1A. Tento proteín inhibuje rast experimentálne a metastazirovanieopuholey charakterizovaná nadmernou expresiou ErbB2. To pokazaltakzhe ich účinnosť vo fáze I klinických testov (Yu, Hung, 2000).

Zvýšená expresia ErbB2 je nevyhnutne v kombinácii s vysokými urovnemaktivnosti zodpovedajúcimi tyrozínkinázy. Preto dannogofermenta inhibítory môžu mať protinádorovú aktivitu, ktorá nashlopolnoe potvrdené v testoch vykonaných. Väčšina inhibítor podrobnoizuchen tyrozínkinázy ErbB2-emodinu potláčajúce fosforiliruyuschuyuaktivnost enzým a rast tumoru (Zhang et al., 1995).

Popísaný úspešné pokusy o potlačenie ErbB2 receptora pomoschyugennyh konštrukty kódujúce intracelulárne protilátku anti-ErbB2 odnospiralnyeantitela (Yu, Hung, 2000). Podobné účinky takzhegeneticheski upravené anti-ErbB2 mimetickej peptid.

Inhibičný účinok na ErbB2 nadmerné expresie obladayutproizvodnye receptor kyseliny retinovej, najmä v kombinácii s himiopreparatami.V v poslednej dobe priťahuje pozornosť vytvoreniu vakcíny proti nádorom s nadmernou expresiou proyavlyayuscheyaktivnost ErbB2 (Murrayet al., 2000). Pri použití proteínov a DNA vakcín riadi dostichingibirovaniya ErbB2 nadmernú expresiu a potlačenie prsníka spontannyhopuholey rast u myší.

A konečne, špecifická blokáda transkripcie génov ErbB2 vozmozhnodostich použitím antisencie oligonukleotid (AO) (Roh et al., 2000). Väzba SA na komplementárnu mRNA dochádza k jeho degradácii, ako dôsledok, syntézy blokovanie receptora ErbB2. Predpokladá sa, že JSC môžu byť účinnými inhibítory ErbB2.

Tak dosiahol k dnešnému dňu porozumeniu biologicheskoyroli ErbB2 v normálnej fyziológiu a v nádorových bunkách kľúč k racionálnej voľbu liečebných postupov založených na konkrétnych účinkov na príslušné metabolicheskieputi rostestalo. Liečba nádorov nájdený nový kvalitný kvôli vnedreniemtumorspetsificheskih protilátky namierené proti ErbB2. Naryadus Tie sú navrhnuté, a mnoho ďalších nových protinádorových činidiel, medzi ktoré patrí inhibítory aktivitou tyrozín kinázy, väzby ligandu a transkripčných blokátory. Vedetsyaintensivny hľadaní iných spôsobov ovplyvňovania rôznych zvenyasignalnyh kaskád spojených s ErbB2. Cez sereznyeuspehi použiť úspechy základné vedy klinicheskoypraktike, stále existuje veľa nejasných bodov funktsionirovaniyaERBB2 ktorá nedovoľuje zhodnotiť svoju prognostickú hodnotu diagnosticheskoei a vzťahy s hormonálnou signály.

Okrem toho, naše znalosti o molekulárnej podstata vzaimodeystviymezhdu rastovými faktormi a receptory ako ErbB2 nedostatochny.Eto zabraňuje vyhľadávania špecifické antagonistu dátové molekuly, ktoré by mohli mať protinádorovú aktivitu. Je zrejmé, že životne dôležité funkcie buniek, vrátane epitelu, nahoditsyapod kontrolovať nie jeden, ale mnoho zabezpečovacích systémov. Vyyasnenievzaimodeystvy medzi ErbB2 proteín a G1-proteín receptorov, cytokinových receptorov, adhéznych molekúl, atď novyegorizonty otvoriť ako pre základný výskum a poiskanovyh prostredníctvom protinádorovej terapie.

Zostáva nejasné, a niektoré aspekty deystviyaanti-ErbB2 mechanizmus protilátky, najmä ich schopnosť zvýšiť kardiotoksichnosthimiopreparatov. Možno, že sa vyrieši tajomstvo, kogdastanet jasné, ErbB2 ovplyvňujú apoptózu. Nesomnennoodno: je ťažší praktické úlohy máme nastavené pre seba, tým viac vzniká otázka, generované vzaimoproniknoveniemfundamentalnyh a klinických štúdií.

Referencie:

1. Imyanitov EN Knyazev PG Onkogén aktivácia ErbB 2 onkoproteínov prognoztecheniya a rakoviny prsníka u ľudí // problémy. Oncol. - 1991.- T. 37? 5 - C. 527-534.

2. Imyanitov EN, Chernitsa OI Ivanova OA atď. Amplifikatsiyaonkogena ErbB-2 (HER-2 / neu) v nádory prsnej žľazy -. prognosticheskiymarker pravdepodobnosť relapsu // experiment. Oncol. - 1992. - T. 14? 4. - C. 25-29.

3. Baselga J. Klinické štúdie Herceptin (trastuzumab) // Eur Cancer. - 2001. - Sv. 37, Suppl 1 - P. S18 - S24.

4. Coussens L., Yang-Feng T. L., Liao Y.-C. a kol. Tyrozín kinasereceptor s rozsiahlou homológie k EGF receptoru zdieľa chromosomallocation s neu onkogénu // Science. - 1985. - Sv. 230. - P.1132 - 1139.

5. Dowsett M., Cooke T., Ellis I. a. al. Posúdenie HER2status pri karcinóme prsníka: prečo, kedy a ako? // Eur. J. Cancer.- 2000. - Sv. 36. - S. 170-176.

6. Espinoza F., Anguiano A. HercepTest test: ďalšie perspektívne // J. Clin. Oncol. - 1999 - Zv. 17. - P. 2293-2294.

7. Harari D, Yarden Y. Molekulárne mechanizmy, ktoré stoja ErbB2 / HER2action pri karcinóme prsníka // Oncogene. - 2000. - Sv. 19. - P. 6102- 6114.

8. Imyanitov E. N., Chernitsa O.I., sérové ​​O.M., výskyt Knyazev P.G.Rare amplifikácia HER-2 (ErbB-2 / neu) oncogenein pacientok s karcinómom vaječníkov // Eur. J. Cancer. - 1992. - Sv. 28A.- P. 1300.

9. Imyanitov E. N., Chernitsa O.I., sérové ​​O.M. a kol. Amplificationof HER-2 (ErbB-2 / neu onkogénu) ako najvýznamnejší prognosticfactor v skupine ruských pacientov s karcinómom prsníka // Neoplasma.- 1993. - V. 40. - S. 35 - 39.

10. Klapper L.N., Waterman H., Sela M., Yarden J. Tumor-inhibitoryantibodies na HER-2 / ErbB-2 môže pôsobiť tým, že regrutuje c-Cbl a enhancingubiquitination z HER-2 // Cancer Res. - 2000. - Sv. 60. - P.3384 - 3388.

11. Knyazev P. G., Imyanitov E. N., Chernitsa O.I. a kol. Amplificationof ErbB-2 (HER-2 / neu) onkogénu v rôznych novotvary patientsfrom ZSSR // onkológie. - 1992. - Sv. 49. - S. 162 - 165.

12. Hmotnostný R. Úloha HER-2 expresie v predpovedanie ResponseTM terapii karcinómu prsníka // Semin. Oncol. - 2000. - Sv. 27, Suppl 11. - S. 46 - 52.

13. Murray JL, Przepiorka D, Ioannides CG. Klinické štúdie ofHER-2 / neu-špecifické vakcíny // Semin. Oncol. - 2000. - Sv. 27, Suppl 11. - S. 71 až 75.

14. Piccart IU, Di Leo A., Hamilton A. HER2: a `predictivefactor` pripravený na použitie v každodennom riadení prsníka cancerpatients? // Eur. J. Cancer. - 2000. - Sv. 36. - P. 1755-1761.

15. Roh H., Pippin J. A., D. W. Green a kol. HER2 / neu antisensetargeting ľudského karcinómu prsníka // Oncogene. - 2000. - Vol.19. - P. 6138 - 6143.

16. Slamonovi D. J., Glarn G. M., Wong S. G. a kol. ľudskej rakoviny prsníka: korelácia relapsu a prežitie s amplifikáciou theHER-2 / neu onkogénu // Science. - 1987. - Sv. 235. - P. 177 -182.

17. Srinivasan R., Gillett C. E., D. M. Barnes, Gillick W. J. Nuclearexpression na c-ErbB-4 / HER-4, receptor rastového faktora v invasivebreast rakoviny // Cancer Res. - 2000. - Sv. 60. - P. 1483-1487.

18. van de Vijver IU Posúdenie potreby a appropriatemethod skúšanie pre ľudský receptor epidermálneho rastového faktora-2 (HER2) // Eur. J. Cancer. - 2001. - Sv. 37, Suppl 1 - P. S11- S17.

19. Yu D., Hung m.č. Nadmerná expresia ErbB2 v rakoviny a ErbB2 targetingstrategies // Oncogene. - 2000. - Sv. 19. - P. 6115-6121.

20. Zhang L., C. J. Chang, Bacus S. S., Hung m.č. Potlačil transformationand indukovanej diferenciácie HER-2 karcinóm prsníka buniek / neu-zvýšenou expresiou podľa emodinu // Cancer Res. - 1995. - Sv. 55. - P.3890 - 3896.