Onkologiya-

EV Fleishman

Ruský onkologické vedecké centrum pomenované po NN RAMS, Moskva

zdroj RosOncoWeb.Ru

Späť na konci 80. rokov - začiatku 90. rokov sa dospelo k záveru, že chtohromosomny analýza je jedným z najdôležitejších prognostický metodovpri nelimfoblastnyh akútnou leukémiou (ONLL). Tento záver podtverzhdendannymi veľkých multicentrických štúdiách posledné roky (Grimwade et al., 1998- Kern et al, 2000- slovenských et al, 2000, Visaniet al., 2001).

Táto správa sa venuje možnostiam tsitogeneticheskogoanaliza a jeho miesto medzi ostatnými prognostických kritérií. Predstavlenobzor literatúry a našich vlastných dát, poluchennyev cytogenetice laboratórium RCRC z RAMS úzko svrachami hematologických obe komory Cancer Center a ďalších zdravotníckych zariadeniach Moskva (355 prípadov ONLL).

Zmeny Karyotyp charakteristický ONLL, môžu byť rozdelené do troch skupín, v závislosti na ich prognostický význam. Pervayagruppa zahŕňajú chromozomálne abnormality, predpovedajúci dobrou odpoveďou na liečbu, že podiel pacientov s ochorením bez 5-ročnej vyzhivaemostyusostavlyaet 60-70%. V skupine so zlou prognózou je len orientačná, že vyššia ako 10-15%. Ostatné zmeny karyotypu acsotsiirovanys "stredná" odpoveď na liečbu (Grimwade et al., 1998). Prognostický význam jedného chromozómu anomaliymozhno stanoviť iba porovnaním skupiny pacientov liečených poluchavshihodinakovoe. Napríklad, boli spracované podľa protokolu na 1991 oddelenie detskoygematologii nášho centra, 16 detí s prognosticky blagopriyatnoyhromosomnoy translokácie t (8-21)"7 + 3"A po roku 1991, 12 detí s rovnakým liečenie anomalieypoluchili na modifikovaného protokolu BFM-87. U pacientov podavlyayuschegobolshinstva získať úplné remisii. Bezretsidivnaya5-ročné prežitie v prvej skupine bol 15,3 + 10%, a za druhé - 58,3 + 20% (p = 0,03).

Separácia veľké heterogénne skupiny s akútnou myeloidnou leykozovna troch prognostických skupín podľa osobennosteykariotipa navrhnuté asi pred 20 rokmi (Heim et Mitelman, 1995) .Pre minulých rokoch, klasifikácia sa zmenil a naďalej menyatsya.Eto v dôsledku nahromadenia nových poznatkov o klinických znacheniinesluchaynyh chromozomálnych abnormalít.

V okamihu, keď k zmene karyotyp, ktoré majú hodnotu blagopriyatnoeprognosticheskoe zahŕňajú chromozomálne translokáciu t (8-21) (q22-q22), t (15-17) (q22-Q21), t (16 až 16) (p13-q22) a inverzia chromozómu 16 -inv (16) (P13-Q22). Skupina cytogenetická mení imeyuschihneblagopriyatnoe prognostický význam zahŕňajú zmeny dlinnogoplecha chromozómu 3 ovplyvňujúce oblasti 3q21 a / alebo 3q26, utratyhromosom piata a siedma dvojica, delécií dlhého ramena hromosomy5, translokáciu t (6-9) (P23-Q34) a T (9 -22) (Q34-Q13), razlichnyeperestroyki krátke rameno chromozómu 17, a komplexné zmeny karyotypu, tj leukémie s tromi alebo viacerými chromozomálnych abnormalít. prípady Vseostalnye spadajú do strednej prognózou skupiny. Ostanovimsyana niektoré nové údaje, ktoré sú dôležité pre klinickú prax.

Väčšina zahraničných kliník a multicentrických zmeny issledovaniyahvse v chromozomálne oblasti 11q23 uvedenej prognosticheskineblagopriyatnym. Je známe, že zmeny v tejto oblasti sú veľmi rôznorodé, je popísané najmä chromozomálne oblasti 11q23 translokácia boleechem 40 rôznych oblastí karyotypu. Každý z týchto anomálií, hoci to je cytogeneticky homogénna skupina môže zatragivatraznye gény, a to vedie k rozdielom v citlivosti khimiopreparatam.

Cytogenetické zmeny, pri pohľade na svetle mikroskopiiabsolyutno identické, sa líšia, pokiaľ sa zistí ich izucheniyaispolzuyutsya pre molekulárne genetickými technikami, ako je fluorestsentnayain situ hybridizácia (FISH) a polymerázovou reťazovou reakciou (PCR) .S týchto metód, ktoré v prípade, že sú ONLL odroda eschebolee genetická variabilita, než bolo obnaruzhenopri štandardné analýza chromozómov. K dnešnému dňu nakopilisfakty ktoré neumožňujú zahrnúť všetky zmeny v regióne 11q23 gruppuprognosticheski abnormalít nepriaznivý karyotyp. Už serediny90 publikovaných sériu pozorovania ukazujú horoshemeffekte liečenie leukémia s translokácie t (9-11) (Mrozek et al, 1997, Swansbury bicyklov, 1998- Pui et al, 2000 ..): V päťročnom vyzhivaemostsostavila 60-70 %, teda rovnaká, ako v skupine s abnormálnym karyotypu prognosticheskiblagopriyatnymi.

Nedávna medzinárodná multicentrických hodnotenie, vklyuchayuschiebolshie séria (stovky prípadov) liečených rovnako ONLL, pozvolilipridti k záveru, že prognóza ONLL s preusporiadanie vovlekayuschimirayon 11q23, je daná nielen génmi umiestnenými veto priestor, ale aj druhý člen translokáciu.

Ďalší príklad - translokácie t (10 až 11) (p12-13-Q23). Táto anomália ochenredkaya (1-2% ONLL). Drvivá väčšina patsientovs translokáciou t (9-11) (P22-Q23) a t (10-11) (p12-13-Q23) jeden z nasledujúcich: gén zúčastňujúci MLL génu. Keď translokácie t (9-11) je známy iba jeden možný partnera MLL génu zahŕňajúce kotorogovoznikaet kondenzovanú (chimérická, hybridná) gén. Zároveň molekulárnej geneticheskoeizuchenie translokácie t (10-11) (p12-13-Q23) found 4 gena.Eto génov MLL a pokojný, lokalizované v oblasti 11q23, a gény AF10i ABI1, v 10p12-13 lokalizovanej oblasti. Údaje o dlitelnostizhizni leukémie s chromozomálne translokácie t (10-11) do vesmanemnogochislenny. V literatúre existujú dôkazy o nižšia ako asi 100 pacientov, ktorí dostávali odlišné zaobchádzanie. Za zmienku stojí veľký variabelnostpokazateley prežitie: U niektorých pacientov k recidíve došlo navtorom mesiac od začiatku remisii, zatiaľ čo iní prežili 5 rokov. Molekulárna geneticheskieissledovaniya nie vždy vykonané, zdá sa však, že chimérický gén ABI1-MLL spojená s blagopriyatnymprognozom podstatne viac, než ostatní chimérických génov vyplývajúce z translokatsiit (10-11) (Shibuya et al., 2001).

Ďalšia otázka, ktorá musí byť diskutovaná, obavy geterogennostiprognosticheskih skupiny vybrané na základe charakteristík karyotypu, a najmä skupina s priaznivou prognózou. Je známe, že 5-ročné prežitie u tejto skupiny pacientov je 60-70% .Předtím začiatku liečby alebo v priebehu klinickej a hematologickej remissiinevozmozhno presne predpovedať, ktorý bude spadať do 60-70% av kogorazovetsya skoré recidívy. Avšak, mnoho známych klinicheskihpokazateley spojená s horšou prognózou, a to boleechastym vývoj skorého relapsu ONLL. Medzi také pokazateleysleduet uviesť expresiu CD56 antigénu v blastov, nedostatočné zníženie počtu blastov v kostnommozge na 14-21 dňoch liečby, ďalších abnormalít karyotypu, vysokú leukocytózou pri diagnóze (Schoch bicyklov, 1996- Baer a kol., 1997- Daniels et a kol., 1999- Peniket a kol., 1999- Ferrara et al., 2000). K dispozícii sú tiež hlási, že príznaky reziduálne dysplázie (neleykoznogo) buniek kostnej drene eritroidnogoi megakaryocytov zárodky pred liečbou predveschayutnevysokuyu ONLL účinnosti u de novo (Tamura et al., 1998- Lemez et al., 2000). Platí to leukémie blagopriyatnoyprognosticheskoy skupiny, nie je zatiaľ jasné. Identifikovať každý sluchaeOML prognosticky nepriaznivé symptómy vo fáze postanovkidiagnoza môžu byť užitočné pre optimalizáciu liečebných protokolov.

Individuálne počasie, je tu riziko recidívy a výskytu vremyaego jednotlivého pacienta ONLL možné posúdiť bez vykonania molekulárnej monitorovanie minimálnej reziduálnej choroby (MRD). Leukemické bunky, prežívajúce cez primenenietsitostaticheskoy terapiu a pretrvávajúce počas úplnej klinickej a gematologicheskoyremissii predstavujú biologické minimálnu substrát rezidualnoybolezni. Tieto bunky nie sú detekované v klinických testoch krvi kostnej drene, ale detekuje použitím chuvstvitelnyhmetodov, medzi nimi na prvom mieste je tsepnayareaktsiya polymerázy s reverznej transkripciou (RT-PCR). Nastaviť tesnayasvyaz MMR s prognózou. Je ukázané, že sa frekvencia retsidivovznachitelno vyššie u pacientov, u ktorých nie je možné zistiť minimalnuyurezidualnuyu ochorenia v porovnaní s pacientmi, kde zistených MRBne. Ďalej bolo zistené, že viac kolichestvoostavshihsya leukemické bunky, tým menej času od začiatku nástup relapsu remissiido (Radich, 2000). Nové kvantitatívne metodikiPTsR umožňujú monitorovanie MRD je lepší ako kachestvennyemodifikatsii (tobala et al, 2000). nové koncepty "molekulyarnayaremissiya" a "molekulárnej relaps", Zobrazené chtopri dosiahnutie remisie dochádza znachitelnoesnizhenie úroveň chimérického génu transkriptov. Počas gematologicheskoyremissii stanovená konštantné nízku expresiu chimérického transkriptaili PCR negativity, to znamená, že je molekulárna remissiya.Za 4-6 mesiacov pred pravého recidívy suschestvennopovyshaetsya transkriptov, tj, je molekulárnej relaps.

Translokácie t (8-21) (q22-q22) - jeden z najčastejších karyotypu spetsificheskihanomaly v ONLL. To je pozorované u 20% prípadov v vzroslyhi 40% detí s možnosťou M2. V tejto translokácie rezultatesliyaniya fragmenty dvoch génov - AML1 a ETO vytvorená himernyygen AML1-ETO. Chimérický gén alebo transkript môže byť obnaruzhens pomocou PCR alebo FISH sa u všetkých pacientov s t (8-21). V niektorých sluchayahtranslokatsiya zakrytá: to môže byť detekované nie je na standartnomtsitogeneticheskom teste, ale iba pomocou PCR alebo FISH (Krauteret al, 1998). Chimerická transkriptov počas translokácie t (8-21) obnaruzhivaetsyau väčšinu pacientov ani pri dlhodobom remisie (Nuciforaet al, 1993- Kusek et al., 1994). V dôsledku toho, kachestvennayaPTsR nie je vhodný pre monitorovanie MRD u pacientov s t (8-21). KolichestvennayaPTsR umožňuje odhadnúť a predvídať účinnosť liečby gematologicheskiyretsidiv ktorý nutne vyplýva molekulárnej recidívu (tobala et al., 1998). V poslednej dobe publikovanej štúdie, v ktorej privodyatsyadannye že zmiznutie chimerická transkriptov AML1-CH.TP r výsledok liečby veštia dlho stabilné remisii (Morschauseret al, 2000).

Akútnou promyelocytovou leukémie (APL, M3) skhromosomnoy úzko spojená translokáciu t (15-17) (q22-Q21), ktorá yavlyaetsyavazhneyshim diagnostický marker akútneho poškodenia pľúc. V dôsledku tohto translokatsiivoznikayut chimérických génov PML-RARA a RARA -RML. Chimerická transkriptyPML-RARA a RARA -RML sú dôležitými markery pre monitorovanie molekulyarnogodiagnoza a RFI (Grimwade et al., 1997- Kräuter et al., 1998). Ha obrovský materiál (stovky pacientov), ​​bolo preukázané, že zmiznutie chimérického transkriptov konsolidatsionnyhkursov po ošetrení bola sprevádzaná nástupom hematologickej remissii.Pri zachovanie prepis, cez dosiahnutie kompletné gematologicheskoyremissii, druhé sa ukázalo krátky: retsidivy.V pozorované skôr prípady, kedy po dobu PCR negativity ( molekulárnej remisie) chimérický transkript bol znova (molekulárny relaps zistená), takmer vždy najneskôr do šiestich mesiacov vyvinuté gematol ogicheskiyretsidiv (Diverio et al., 1998- Burnett a ďalšie, 1999). Opublikovanyneskolko úspešné pokusy, aby sa zabránilo s hematologickými retsidivOPL, začiatkom liečby počas molekulárnej relapsu (Grimwade et al., 1997- Diverio et al., 1998). Posledný z nich publikatsiy- veľmi povzbudivé: opakované bylidostignuty molekulárne remisie u 12 zo 14 pacientov v dôsledku intenzifikácie terapiivo okamihu molekulárneho relapsu.

Skupina s priaznivou prognózu ONLL tiež leykozys pericentric inverzia chromozómu 16 - inv (16) (P13-Q22) ilitranslokatsiey t (16-16) (P13-Q22), čo malo za následok voznikaethimerny génu CBFB-MYH11. Tieto anomálie sú pozorované vo všetkých bolnyhs morfologické varianty AML-M4Eo, ale tiež zistilo, 40% prípadov AML-M4. Zo všetkých prípadoch, keď je detekovaný himernyygen CBFB-MYH11, iba polovica sú myelomonocytární leukémie, v ostatných prípadoch bola diagnostikovaná M2, aspoň - M1 alebo M5.Himerny transkript CBFB-MYH11 fúzovania gén je detekovaná v vsehbolnyh pomocou PCR (Langabeer et al,. 1997). Kinetika himernogotranskripta CBFB-MYH11 v priebehu študovanom ochorení je horšia ako drugihtranskriptov pacientov v skupine s relatívne ONLL blagopriyatnymprognozom. Vo väčšine prípadov, plný útok molekulyarnoyremissii výrazne zaostáva zriadenie plných gematologicheskoyremissii. Chimerická prepis môže byť stanovená až 24months od začiatku remisie. Relapsy nablyudayutsyau väčšinu pacientov, ktorých prepis je detekované viac ako 6 months od začiatku remisie (Martin et al, 2000). Vzhľad po himernogotranskripta PCR negativity obdobie, počas remisie predveschaetpriblizhenie hematologickými relapsu (Laczika et al., 1998).

Náš výskumný tím vedie pacientov molekulárnej monitoring26 s prognosticky priaznivým chromozomálne anomaliyami.Rabota začali asi pred dvoma rokmi. V jednom prípade, 21 udalosprovesti od dvoch do šiestich testov PCR. V tejto správe ostanovimsyatolko na skupine pacientov s údaje translokácie t (8-21) (10sluchaev). V 6 z nich rovnakým spôsobom ako vo väčšine opublikovannyhnablyudeny, nájdených zachovanie chimérického prepis fonepolnoy remisie v trvaní od 3 do 24 mesiacov. 4 pacienti vyyavlenaPTsR-negativita: u 2 z 3 pacientov vyšetrených počas dlitelnoyremissii (mBFM-87 protokolu), a u 2 zo 4 - v raných fázach liečebného programu otnachala AML 2000. možno dôvod pre skoré (do 6 mesiacov od začiatku remisie) zmiznutie transkriptayavlyaetsya znížiť počet leukemických buniek obuslovlennoevesma agresívne terapiu. Ďalšie pozorovania ukazuje kakoeprognosticheskoe význam zmiznutie Prepis AML1 ETOU našich pacientov.

Teraz sme urobili naše prvé kroky pri použití jedného z modifikatsiytak nazvaný konkurenčné RT-PCR na stanovenie úrovne himernogotranskripta AML1-ETO v kostnej dreni a v krvi pacientov (kolichestvennyymetod). 6 osôb opýtaných. Potvrdená literaturnyedannye zníženie chimerická prepis po prvom terapevticheskihkursov (indukcie a konsolidácie). U dvoch pacientov, obsledovannyhneskolko časy počas remisie, zafiksirovanopostepennoe pokles hladín transkriptov. Pozorovanie prodolzhaetsya.Planiruetsya intenzifikácie terapie po zistení molekulyarnogoretsidiva.

Tieto dáta ukazujú, že je potrebné pokračovať s tsitogeneticheskihissledovany ONLL objasniť prognostické znacheniyaotdelnyh chromozomálne abnormality, najmä vzácne izmeneniykariotipa. Tieto štúdie nie sú možné bez použitia molekulárneho geneticheskihmetodik. Veľké nádeje sú pripol na sledovanie MMR ako perspektivnyymetod individuálny prognózu.

Referencie:

1. Baer MR, Stewart CC, Lawrence D et al. Blood 1997, 90: 1643-1648.

2. Burnett AK, Grimwade D, E Solomon et al. Blood, 1999, 93: 4131 - 4143.

3. Creutzig U, Zimmerman M, Kittery J. a kol. Br J Haematol. 1999.104: 630-639.

4. Diverio D, Rossi V, Avvisati G et al. Blood, 1998, 92: 784-789.

5. Grimwade D, Gorman P, Duprez E et al. Blood 1997, 90: 4876-4875.

6. Grimwade D, Walker H, Oliver F et al. Blood 1998, 92: 2322-2333.

7. Ferrara F, Morabito F, Martino B.J a kol. Clin Oncol. 2000,18: 1295-1300.

8. Heim S, Mitelman F. Cancer Cytogenetics. Po druhé vyd., Wiley-Liss, 1995.

9. Kern W, Schoch c, Haferlach T et al. Leukémia 2000, 14: 226-231.

10. Kräuter J, Paschberg B, Heinze B et al. Br J Haematol.1998,103: 72.

11. Kusek R, Laczika K, Knoblich P et al. Leukémia 1994, 8: 735-739.

12. Laczika K, Novak N, Hilgarth B et al. Clin Oncol. 1998 16: 1519-1525.

13. Langabeer S, Walker H, Rogers HR a kol. Brit J Haematol.1997, 99: 925-928.

14. Lemez P, Gáliková J, Haas T et al. Leuk Res 2000, 24: 207-15.

15. Martin G, Barragan E, Bolufer P et al. Haematologica 2000,85: 699-703.

16. Morschhauser F, Çayeli JM, Martini S et al. J Clin Oncol.2000, 18 (4): 788-94.

17. Mrozek K, Heinonen K, Lawrence D et al. Blood 1997, 90: 4532-38.

18. Nucifora G, Larson R, Rowley JD. Blood 1993, 82: 712-715.

19. Peniket AJ, Wainscoat JS, Wheatley K. a kol. Krv 1999- 94: 496a.

20. Radich JP. Curry Opin Oncol, 2000, 12:. 36-40.

21. Schoch C, Haase D, Haferlach T et al. Leukémia 1996, 10: 1288-1295.

22. Slovenskí ML, Kopecký KJ, Cassileth PA et al. Blood, 2000, 96: 4075-83.

23. Shibuya N, Taki T, Mugishima H et al. Gény Chróm Cancer2001, 32: 1-10.

24. Swansbury GJ, Slater R, Bain BJ a kol. Leukémia 1998, 12: 792-800.

25. Tamura S, Takemoto Y, Wada H et al, 1998 Brit J Haematol.101:. 743-748.

26. tobala K, Liu Yin JA. Leuk lymphoma, 1998, 1-2: 115-120.

27. tobala K. a kol. Blood, 2000, 95: 815-819.

28. VISAN G, Bernasconi P, Boni M et al. Leukémia 2001,15: 903-909.