Antigén prezentujúce funkciu dendritických buniek imunomodulátorov. Vplyv imunomodulátor na lymfocytoch

Záverečná fáza funkcie dendritických buniek ako súčasť prirodzenej imunity je antigénu prezentáciu a dáva smer T-bunkovej imunitnej odpovede. Preto boli vykonané pokusy o vplyve na antigén IMMP funkcie DC a ich schopnosť prezentovať antigén na naivných T lymfocytov.

Najmä to bol skúmaný schopnosť dendritických buniek, vytvorený pod vplyvom IMMP, stimulovať proliferáciu lymfocytov syngenních myši CBA. Za týmto účelom, ML sleziny myší (106 buniek) koinkubirovali počas 6 dní s DC (5 x 104), získaných z buniek kostnej drene exponovaných IMMP. Ako referenčný lieky používané LPS K. pneumoniae a TNF-u.

ohodnotenie proliferačnej aktivita ML, stimulovanej dendritických buniek bola vykonaná kolorimetrickým testom za použitia vitálneho farbiva AlamarBlue (Biosours, USA). Vypočítaná stimulačný index, ktorý charakterizuje pomer proliferačnej aktivitu ML ak stimulované zrelý DC až ML proliferačnej aktivitu, keď sú stimulované nezrelých DC.

Tvoril pod vplyvom IMMP, Zrelé dendritické bunky stimulovanej proliferačnej aktivity mononukleárnych leukocytov myší. Aktivita týchto buniek bola porovnateľná s aktivitou DC zrel po interakcii s LPS alebo TNF-a, s výnimkou DC stimulovaných ARF. V tomto prípade proliferácie lymfocytov bola nižšia v porovnaní s inými látkami zo DC dozrievania, ale vyššia ako u nezrelých DC. Toto môže byť spojené s tvorbou bazéna makrofágov, ktoré sú nižšie ako aktivita zrelých DC. V tomto prípade je stimulačný index 1,4 vo všetkých ostatných prípadoch, stimulačné index bol v rozmedzí 2-2.3.

Nasledujúce experimenty skúmané antigén prezentujúce funkcie dendritických buniek, odvodený od buniek kostnej drene myší, ktoré boli vytvorené pod vplyvom IMMP schopnosť DC prezentovať antigén T lymfocytov bola hodnotená zmenou aktivity cytotoxických lymfocytov ich kultiváciou v prítomnosti DC.

ako to urobiť, Nezrelé dendritické bunky naložené lyzáty rôznych nádorových buniek a inkubované s imunomodulátory po dobu 16 hodín. DC boli premyté a potom inkubované s syngenních myšou lymfocyty v pomere 1:20 po dobu 6 dní v médiu RPMI-1640. Kontroly boli DC nelieči lyzát nádorových buniek. Ďalej sa premyjú lymfocyty koinkubirovali kultivovať nádorové línie študovaných v pomere 5: 1, po dobu 24 hodín.

Potom sme vyhodnotili lymfocyt cytotoxicity na nádorových bunkových línií myšieho lymfómu YAC-1, Ehrlich, L929, 562 K v testovacej vymáhania 3- (4,5-dimetyl-thiazol-2-yl) -2,5-difenyltetrazoliumbromid (MTT-test). V prvej fáze sme určili schopnosť DCS prítomných antigénov vystavené Immunovac-VP-4, kontroly boli DC ošetrených TNF-a.

lymfocyt cytotoxicity proti nádorové línie testované pohyboval v rozmedzí 33,9-43,9%, prídavok nezrelých DC neviedlo k výraznému zvýšeniu tohto parametra. DC zrejúce vplyv vody VP-4 vakcínu, mal schopnosť prezentovať antigén naivný T-bunky, čo vedie k tvorbe cytotoxických efektor, ktoré sú súčasťou špecifického adaptívne imunity.

A skutočne, po do kontaktu in vitro T-lymfocytov z zrejúce pod vplyvom rôznych induktorov dendritických buniek, ktoré boli načítané s antigénmi študovaných transplantovateľných nádorové bunkové línie T-bunky získavajú schopnosť lyžovať prezentovaných antigén homológne k cieľovej bunke. DC aktivovaný Immunovac-PE-4, a naložené nádorovými antigény, poskytované v homológnej zvýšenie systéme cyto-toxicity na 83,5-79,3%. DC aktivované s TNF-a a naložené nádorovými antigény, v homológnym systéme, za predpokladu, že rovnaký stupeň cytotoxicity 89,1-72,5%. Zároveň proti iným antigénom nádorových buniek, ktoré neboli ošetrené DC, cyto-toxická aktivita bola nižšia a pohybovala sa medzi 59,3-37,5% aktivácia Immunovac-VP-4 a 59,3-40,1 % s TNF-a.