Cytogenetická analýza choriových klkov buniek placenty.

Bunky choriový klkov (Placenta), k dispozícii pre cytogenetickou analýzou, majú rôzny pôvod:
- cytotrophoblast bunky, diferenciácie, ktoré proiskhoditna morula fázy;
- mezenchýme bunky, že odlíšiť z vnútornej bunkovej hmoty embrya do štádia blastocysty.

Video: Cytogenetické metódy výskumu

pre analýza chromozómu bunky chorion alebo placenty s použitím dvoch základných metód.

1. Dlhodobá kultivácia v jednovrstvovej kultúre. Rovnako ako v prípade analýzy buniek AF, existuje veľké množstvo modifikácií kultivácia choriových klkov bunky. Pre viac informácií o nich môže byť v príslušnej literatúre. Konštatujeme, že iba rastúca primárne kultúry sú heterogénne bunkové kompozície s prevažujúcou rastom podobných fibroblastom mezenchýmových stromálnych buniek klkov. tvorba kolónií alebo uvoľnené monovrstva sa zvyčajne vyskytuje v 10 až do 12. dňa kultivácie. Základné princípy kultúr analýzy bunkovej choriových klkov a interpretáciu výsledkov sú podobné tým z kultúr buniek AF.

2. "Priame" drogy choriový klkov. Metóda analýzy "priame" formulácie na báze prostriedku štúdii spontánne štiepnych cytotrophoblast buniek bez predchádzajúcej kultivácie. Prvé lieky choriový klkov tkanivo obsahujúce metafázový tanier uspokojivej kvality, a to bez použitia skupiny bunkové kultúry boli získané Milanese výskumníci v čele G. Simoiii. V nasledujúcich rokoch bolo navrhnuté rôzne modifikácie tohto spôsobu, ktoré zatragshzayut všetky fázy spracovania klkov. V podstate všetky varianty tohto spôsobu môžu byť rozdelené do dvoch skupín:
- skutočná "priamy", založené na krátkodobé (2-3 hodín) pred preinkubace natívne klkov hypotonické ošetrenie a fixáciu;
- "semidirect"Za predpokladu, že zvyšujúce sa dobou inkubácie natívneho klkov v živnej pôde s nutričných doplnkov 24,48 alebo 72 hodín.

Napriek zdanlivej jednoduchosti, Tieto metódy zriedka poskytujú konzistentné výsledky, a preto majú tendenciu byť použité v spojení s kultiváciou. Typické nevýhody priame metódy opísané prevedenia sú malé množstvo metafázových dosiek artefakt strata chromozómov počas macerácia vzorky v kyseline octovej a malú vhodnosti chromozómov v diferenciálnej farbenie referenčnej s farbivom Giemsa. Počítanie mitóz na "priamych" a "polovičná línia» prípravky ukázali, že po inkubácii klkov dobu 2 až 3 dní, mitotická aktivita cytotrophoblast buniek je vyššia ako pri 2 alebo 24-hodinové inkubácii. To naznačuje, že v čase biopsia buniek, dochádza k "šoku", ktorý zasahuje do parametrov bunkového cyklu a vstupayutv mitózy.

sme vyvinuli Vlastné metóda priamej modifikácie - metóda "shake-off-imprinting" a rýchlym spôsobom dopredu. Použitie veľkých dávok kolchicínu pri súčasnom spracovaní v hypotonická roztoku umožňuje získať lieky z CVS / placenty v tehotenstve od 10 do 20ned ktoré spĺňajú všetky kritériá karyotypu. V spojení s fluorescenčnej metódy diferenciálnej farbenia chromozómov účinnosti týchto metód je viac ako 99%.

Video: Vision Cyto - Tradičné metódy analýzy cytologických

Je potrebné zdôrazniť, že sa jedná o vhodný pre modifikáciu prípravky Food chromozómov z tkaniva s vysokým mitotickými prirodzenou aktivitou, vrátane všetkých tkanivách a orgánoch embryá. Medzifázové jadra, ošetrené týmto spôsobom, sú veľmi vhodné pre ryby, metódy so špecifickými sondami DNA, čo je dôležité pri overovaní prenatálnej cytogenetickej diagnostiky. Podrobné spôsoby prípravy a diferenciálnej farbenie prevedeniach popísaných vyššie.

vysoká účinnosť, rýchlosť a spoľahlivosť s najnižšími nákladmi za predpokladu, že rýchle zavedenie týchto modifikácií v rôznych prenatálnych diagnostických centier v Rusku a SNŠ.