Stanovenie počtu krvných doštičiek v krvi

Stanovenie počtu krvných doštičiek - kľúčovú metódu výskumu, ktorý je schopný zistiť najbežnejšie problémy s krvnou hemostatickej potenciálom - trombocytopénia. V súčasnej dobe sa na stanovenie počtu krvných doštičiek má niekoľko laboratórnych techník (automatizovaný Foni et al.). Najväčšia presnosť je mikroskopická metóda výpočtu kamery, ale táto metóda vyžaduje laboratórne lekár skúsenosti únavu očí, sústredenie.

princípom metódy

Princíp metódy je založený na stanovenie počtu krvných doštičiek ich počítanie v Goryaev komore alebo konvenčné svetelnej mikroskopie použitím mikroskopu s fázovým kontrastom riedením predpona krvi po červených krviniek hemolýzy a šťavelanu amónneho.

Aby sa zlepšila presnosť metódy počet mikroskopických doštičiek počíta v oboch komorách, a potom sa vypočíta aritmetický priemer.

Reagenty a zariadenia

• 1% roztok šťavelanu amónneho.
• Sali mixér.
• Goryaev komora (2 ks.).
• Svetelným mikroskopom so zväčšením 40 x mikroskopu alebo s fázovým kontrastom prefix (napr., CF 4 a pod.).

Krvné vzorky pre výskum

Stanovenie počtu krvných doštičiek v krvi, prípadne stabilizované s citrátom sodným alebo uložených na stenách plastové rúrky jemný prášok, etyléndiamíntetraoctovej kyseliny (EDTA). Pri použití mikroskopické metódy sa krv do citrátu sodného výhodnej odstránenie EDTA vplyv na počet krvných doštičiek výsledky.

výkon technika

Suchá plastové rúrky je vyrobená z 1,98 ml 1% šťavelanu amónneho a 0,02 ml krvi. Pomaly a opatrne sa mieša po dobu 2 minút a potom sa inkubuje 20 minút pri teplote miestnosti. Ďalej, dve komory naplnené obsahom Goryaeva skúmaviek a na 10 minút umiestni ich do Petriho misky, ktorá je za mokra alebo nasýti, gáza filter. Po tejto inkubácii, ktorá je potrebná pre sedimentáciu doštičiek počíta počet 25 štvorcov. Aritmetický priemer výsledkov počítanie v oboch komorách vynásobené 1000. V dôsledku šetrenia citrátovej krvi sa zvýši o 10% a vynásobí 1000, ktorý umožňuje korigovať riedenie krvi v roztoku citrátu sodného.

Video: Krvné doštičky, plus zvýšené krvné doštičky, po odpočítaní znížení krvných doštičiek v krvných testoch

Vyhodnotenie výsledkov štúdie

U zdravého človeka sa počet krvných doštičiek v periférnej krvi pohybuje v pomerne širokom rozmedzí - od 150 do 400 x 109 / L.

Neprípustný štúdie sa počet krvných doštičiek v krvných vzorkách v chladničke. Keď hemolysis možné podcenenie počtu krvných doštičiek. V niektorých prípadoch, v štúdii o počte krvných doštičiek na hematologických analyzátorov pseudotrombocytopénia spĺňa tzv vzhľadom k agregáciu krvných doštičiek a skupiny v prítomnosti EDTA. Tento problém je riešený v krvných vzorkách citrátu sodného.

Pre zaistenie kontroly kvality pri počítaní počtu krvných doštičiek na hematologických analyzátorov, sú kontrolné vzorky s rôznym obsahom týchto buniek. Na možnosť použitia týchto vzoriek na zabezpečenie kontroly kvality pri výpočte počtu krvných doštičiek mikroskopických metód neexistuje žiadna všeobecne uznávané odporúčania. Pre zlepšenie presnosti výsledkov mikroskopické vyšetrenie by mala pravidelne sledovať reprodukovateľnosť stanovenia počtu krvných doštičiek v rôznych laboratórnych techník počas pracovného dňa a na základe prijatých dát pre zvýšenie presnosti a nižšie variáciu, keď variačný koeficient tejto techniky mikroskopické metódy v experimentálnej laboratóriu nie je vyššia ako 10%.

Video: Praktické zručnosti vo fyziológii počítaním počtu červených krviniek

Interpretácia výsledkov prieskumu

Klinický obraz ťažkej idiopatickej trombocytopenickej purpury dominantné hemoragickej syndrómu. Pri sekundárnej trombocytopénia hemoragický syndróm, všeobecne mierne, a v kombinácii s klinickými príznakmi základného ochorenia, prispievajú k trombocytopénia. V tých prípadoch, kde je počet krvných doštičiek je menšia ako 100 x 109 / l dlho pozorovanej bez podkladových prejavov ochorenia, je potrebné myslieť na idiopatickej trombocytopenickej purpury.

Trombocytóza je tiež pozorovaný v myeloproliferacemi. Často v pozadí mieloproliferatsii nesplnenie povinnosti označiť reologických vlastností krvi splatnosti poliglobulii. V poslednom prípade, rovnako ako počet krvných doštičiek viac ako 700 x 109 / l u pacientov zvyšuje riziko trombózy. Avšak proti myeloproliferatívnou ochorenia spojené trombocytóza 1500 x 109 / l, paradoxne hemoragickej syndróm pozorovaný.

V prítomnosti trombocytopénie a hemoragickej históriu od raného detstva je veľmi dôležité odhadnúť veľkosť krvných doštičiek v t. H. MPV (priemerný objem) v krvnom nátere, a tiež prítomnosť inklúzií v krvných doštičkách.

príčiny chýb

• Pri použití jedinej kamery, menej štvorca počítané.
• Nepresnosť kalibrácie rôznych miešačky.
• Chyby Preanalytická fáza štúdie, vo Vol. H. zlom dávkovanie citrátu na odber žilovej krvi.
• Nedostatočná kvalifikácia laboratóriu.

Ďalší analytické techniky

Prakticky všetky hematologických analyzátorov dobre merať počet červených krviniek a leukocytov, dobré výsledky sú presné a reprodukovateľné Spôsob stanovenia ukazuje, koncentrácia hemoglobínu realizovaný v týchto zariadeniach. Avšak, v súčasnej dobe existuje viac analyzátory vzorky, ktoré počtu doštičiek pre počítanie trombocytopénia je nepresné, a spravidla je nadhodnotenie počtu krvných doštičiek v automatizovanej počítania. Najmä jasne preukázali, že tento nedostatok Pri manipulácii so vzorkami krvi, v ktorých počet trombocytov pod 50 x 109 / L. Táto nevýhoda je dôsledkom skutočnosti, že krvné doštičky sú oveľa menšie, než u iných krvných buniek, tak ťažké vykonať správny počet je v rovnakej bunke a rovnakou technikou ako ostatné krviniek. Treba tiež poznamenať, že počítanie presnosť na doštičke hematologické ukazovatele analyzátor veľmi významný vplyv na kvalitu a spoľahlivosť použitých kalibrátorov. To je dôvod, prečo v ťažkých situáciách alebo diagnostických trombocytopénia v histórii objasniť počet krvných doštičiek by mali byť použité mikroskopické techniky.

Počítanie krvných buniek farbených náteroch majú nízku presnosť a reprodukovateľnosť, takže to nemôže byť odporúčaný pre použitie v moderných nemocniciach.