D-dimér: čo to je norma

Pôsobenie enzýmu komplexu t-PA-plazminogénu produkoval enzým schopný ničiť fibrínovú zrazeninu, - plazmínom. V priebehu degradácie fibrínu, vykonáva tento kľúčový enzým v fibrinolytického systému v protofibril (D = D-E-D = D-E-D = D) sú oddelené D-diméry (D = D) a E fragmentov (E-). Vzhľadom k tomu, D-diméru sú D-D-väzby (zosieťovania), ktoré nie sú prítomné v fibrinogén, fibrín monomér a voľné fibrínový polymér, zvýšenie jeho koncentrácia v krvi ukazuje realizácii aktivácia koagulácie a fibrinolýzy.

princípom metódy

Princíp metódy ELISA je založený na špecifické väzbe D-dimér monoklonálne protilátky na mikrodoštičiek povrchu. Po odstránení látky, ktoré nie sú viazané na mikrodoštičky, inkubované s enzýmom značená protilátka (konjugát). Výsledkom je, že na povrchu, na ktorom mikrodoštičiek prístupových protilátok značených enzýmom komplexov na existujúce D-dimér-anti-O-diméru. Pridané po premytí 3,3`, 5,5`-tetrametylbenzidín umožňuje vyhodnotiť aktivitu enzýmu charakteristického sfarbenia testovacej zmesi. Intenzita farby je priamo úmerná enzymatickej aktivity, a teda množstvo analytu vo vzorke.

Reagenty a zariadenia

• Enzým (králičie alebo kozie protilátka konjugovaná s chrenovou peroxidázou).
• Mikroplatnička potiahnuté anti-D-dimér otvoru.
• Kalibrátor / kalibrátory.
• Vzorka vyrovnávacej pamäte.
• Premývací pufer.
• Roztok chromogénu / substrátu (chromogén - tetrametyl benzidínu podkladu - peroxid vodíka).
• Zastavovací roztok (kyselina 0,5 M sírovej).
• Zariadenie na vykonanie ELISA (podložku, čítačku pre tablety a ďalšie.).

Distribútor Diagnostická súprava činidiel - CJSC "BIOHIMMAK".

Krvné vzorky pre výskum

Ako vzorka pre stanovenie koncentrácie D-diméru, použitie stabilizované plazmové citrátu sodného plnej krvi. Rysy prípravu vzoriek podrobne skúmala v prílohe 3.

Videá: Zvýšenie D-Dimer s IVF (? Má e-dimér implantácii)

metódy stanovenia

Činidlá súčasťou súpravy, a doska pred testom musí byť pri izbovej teplote. Sekvencia akcií laboratórium lekár pri stanovení hladiny D-diméru sa musia úplne v súlade s pokynmi na kitu reagencií.

Video: Express analyzátor kardiomarkerů a D-dimér RAMP Reader

Výsledky vyhodnotenia štúdie pre meranie koncentrácie D-dimérov je nutné použiť kalibračnej krivky. Kalibrátory v duplikátu sa odporúča preskúmať definície, ako aj vytvoriť novú kalibračnú krivku pre každý nový diagnostických súprav. Pre konštrukciu kalibračnej krivky pomocou hodnotu absorbancie získané v detekcii rôznych koncentrácií D-diméru.

Je potrebné zdôrazniť, že v čase písania monografie žiadny všeobecne prijímaný štandardný D-dimér, takže výrobcovia používajú rôzne diagnostické súpravy a vzorky jednotiek pre jeho určenia. Okrem tradičného obsahu indikácia hmotnosť na jednotku objemu (mg / l ng / ml, ug / ml, mg / l, nmol / l), rada výrobcov diagnostických súprav návrhov stanovenie D-dimérov hodnotených v jednotkách ekvivalentných fibrinogénu (FEU mg / L).

Video: Mazanie gear grinder (LBM)

Táto vlastnosť je veľmi dôležitým faktorom, pretože v rôznych prevedeniach prezentácii výsledkov výskumu objavia koncentrácie (mg / ml), a normálny rozsah a výsledky pre stanovenie rôznych meracích jednotiek sa líši od asi 2 krát. Často, vzhľadom na nedostatok jednotných noriem, rozdiely v pozadí mnohých patologických stavov (DIC, pľúcna embólia a niekoľko ďalších), pri použití rôznych možností pre vyjadrenie výsledkov sa líšia o viac ako 2 krát.

Vzorec na výpočet výsledkov stanovenie koncentrácie D-dimérov v SI: [nmol / l] = [ug / ml] x 5476. Najbežnejšie používané hmotnostné jednotky si navzájom zodpovedajú nasledujúcim spôsobom: 250 ng / ml = 0,25 ug / ml, 0,25 mg / l = 250 g / l.

Normálne rozmedzie koncentrácií D-diméru sa určuje v každej laboratóriu so znakmi zariadenia a spotrebného materiálu. Normálnej hladiny D-dimérov, určené väčšinou výrobcov je menšia ako 250 mg / l, menej ako 0,5 mg / l FEU. Vzhľadom na to, že polčas D-dimérov je viac ako 24 hodín, jeho hladina je stabilná dostatočne dlho.

Vyhodnotenie výsledkov skúšok by mali byť vykonané s ohľadom na definíciu korektnosti. Ak chcete kontrolovať kvalitu jednotlivých kontrolných laboratóriách navrhnuté použiť materiály s jednotkami odporúčané výrobcom.

Interpretácia výsledkov prieskumu

Stanovenie koncentrácie D-dimérov je často používaný pre detekciu trombózy a tromboembólie. Špecifickosť tohto indexu s ohľadom na trombotických porúch je obmedzená, pretože tento index sa zvyšuje, a na mnohých ďalších patologických stavov.

Aj napriek obmedzený špecifickosti testu, je veľmi vysoký informácie trombóza obsah a tromboembólie, pretože test preukazuje veľmi dobrú negatívnym prognostickým úroveň, tj. Negatívny výsledok testu E. A je takmer vždy svedčí o neprítomnosti tromboembolických procesov.

Vysoké hladiny D-diméru potrebné vykladať s ohľadom na výsledky ďalších testov a klinického ochorenia. Tento index je tiež použiť na hodnotenie antitrombotickej účinnosti terapie.

Ďalšie analytické techniky Navyše ELISA pre stanovenie použitý D-dimérov a iných imunochemických technik (imunoturbidimetrie, immunohemilyuminestsentsiya, latexová aglutinácia, imunochromatografii, membrána imunodifúznemu). Na trhu sú široko zastúpené semikvantitatívne spôsoby stanovenia ho. Mnoho moderných modelov automatických a poloautomatických koagulometrů schopná vyčísliť výšku D-diméru pomocou imunoturbidimetrie.

príčiny chýb

• Nedodržanie režimu skladovanie teploty.
• Porušenie premývanie (pre ručné pranie treba umyť aspoň 3-4 krát). Po premytí odtokové dosky na filtračnom papieri ako kvapaliny, typicky zostávajúce v jamkách po umývaní, môže zasahovať do spodnej substrátu a optickej hustoty vzorky.
• Zmiešanie činidlá z rôznych šarží.
• Kondenzácie vnútri jamiek. Aby sa zabránilo vzniku kondenzácie by nemala otvorení obalu do tej doby, kým sa zahreje na teplotu miestnosti.