Vlastnosti protilátok aktívnych centier. reaktivita imunoglobulínov

metóda spin štítok nemá tiež pochopiť rozdiely vo vlastnostiach králičích protilátok na 2,4,6-trinitrofenyl (TIF) po primárnej a sekundárnej imunizácie. Tieto protilátky boli skúmané za použitia líšia v priestorovej štruktúre spinovej značených TNP-haptény ako EPR a k zníženiu fluorescencie kvantový výťažok protilátok.

Bolo zistené, že protilátka, vzniká pri primárnej a sekundárnej imunitnej odpovede sú rozdiely v štruktúre aktívnych miest. Komplexy primárnych protilátok proti haptény sú menej tuhé a náchylnejšie k organickým rozpúšťadlám a k zmenám v sterických ligandami.

Pietta a zamestnanci (Piette e. A., 1972) skúmali komplexy negatívne nabité spin značené benzoan a kladne nabité komplexy spin-značený králičie trimetilfenilammoniya s vhodnými protilátkami. Súdiac podľa EPR spektier, komplexy protilátky s negatívne nabitými haptény spin značené sú prísnejšie ako komplexy protilátok s kladne nabitou zvlákňovacej značený haptén.
Okrem toho sa zistilo, že stupeň imobilizácie N-O skupina spin-značený benzoát v aktívnom väzobnom mieste pohybovala samostatne v rôznych králikov.

Hsia a Piette (Hsia, Piette, 1969) skúmali skríženú reaktivitu a štrukturálne heterogénnosť králičie anti-DNP protilátky. Porovnávali EPR spektra protilátky izolované pomocou homológnej DNP - (anti-A) a cross-haptén (anti-T) po interakcii s spin-značené DNP (DNP-CM). Bolo zistené, že 59 gaussov komplexné spektrum Amax (anti-DNP + T CM) Amax EPR spektrum komplexu anti-DNP-D- a CM - 62 gaussov.

Amax je funkciou času korelačné a polarity prostredie N-O skupina (Hamilton, McConnell, 1970). Preto rozdiely v týchto EPR spektra môže byť v dôsledku imobilizácie alebo viac N-O skupiny v komplexe (anti-DNP-D + OM), alebo jej ďalší hydrofóbne prostredie. V každom prípade, poukazujú na štrukturálne rozdiely anti-D a anti-T aktívnych centier.

V ďalšej sérii pokusov skúmaného komplexy anti-D homologické s DNP-SM a cross-spin značené haptény orto a para-nitrofenol: ONF-SM a SM-NNF. Amax kríž EPR spektrá spin-značeného haptény, ANE a LNF-SM-SM umiestnená v aktívnych miestach, bol tiež vyšší ako homológnej DNP-CM.

Autori to pripisujú skutočnosti, že homológne haptén Je umiestnený v aktívnom mieste tak, že skupina označenie N-O nie je priamo interagovať s aminokyselinovým zvyškami aktívneho miesta. Na druhej strane, cross-haptenové komplexnejšie formy menej tuhé, pri ktorej je ochranná známka má väčší stupeň voľnosti, ktorý umožňuje, že k interakcii s hydrofóbnymi časťami aktívneho centra. EPR spektra spin značených haptény kríž sa líši od homológnej statických prítomnosť zložiek zodpovedajúcich rýchlejšie otáčanie.

To môže byť spôsobené existencia rovnováha medzi týmito dvoma smermi rotácie mechepyh-haptény v aktívnych centier či nerovné afinity pre rôzne populácie protilátok špecifických pre príslušný haptén.