Zrazenina imunitný komplexy. Interakcia domény reťazca protilátky

stáť agregácie imunitných komplexov by nemala interferovať s fixačným Fc-fragmentu zložky komplementu, a v dôsledku toho ich šírenia v zrazenine. Skúmanie štruktúry konkrétne zrazenina protilátok s antigénmi, bolo vykonané pomocou spin štítkov (Grigoryan et al., 1969). Pre značenie proteínu za použitia nitroxylový radikál syntetizované na základe maleimidu. To kovalentne reagovať s SH-skupiny králičie protilátkou po redukcii s 2-mercaptoetanolu disulfidických väzieb. Keď bola táto aktivita protilátky zachovaná.

V dôsledku toho, zrážky Protilátky spin-značené ovalbumín štítok naďalej voľne otáčať, bez toho aby dochádzalo stéricky zábranu. Na druhej strane, nešpecifické ukladanie protilátok spin značené síranom amónnym za následok silné imobilizácia značiek. Tieto údaje poukazujú na mriežke, voľná štruktúra zrazeniny imunokomplexov.

Pri pokusoch za použitia metóda cirkulárne dichroismus boli zistené rozdiely vo spektrách troch homológnych antipnevmokokkovyh protilátok pred a po ich interakciu so špecifickými ligandami-geksasaharidny (JATON e. a., 1975). Študovali sme zmeny vo spektrách homológne rekombináciou a hybridné H a L reťazcov pôsobením haptény. Homológne rekombinantné protilátky mali spektrum identické so spektrom natívny protilátky, aj napriek absencii meziřetězcové S-S väzieb.

Zmeny vo spektrách dochádza po nadviazaní haptény vo všetkých troch natívnych protilátok, Fab fragmentov a homológnych rekombinantných molekúl. Avšak, neexistuje žiadny dôkaz o konformační zmien na interakciu haptény s getsrologichnymi rekombinantnej protilátky. Tieto výsledky sú potvrdené zmenou fluorescenčného kvantového výťažku protilátok. Ukazujú na vysokej špecifickosti meziřetězcové interakcie v imunoglobulíny.

unikátny informačný V interakčnej doménu v reťazci môžu byť získané spin štítku. Táto informácia závisí na väzobné miesto proteínu. Zodpovedajúce aminokyselinový zvyšok (alebo zvyškov), ku ktorej dochádza väzby štítok je určená jeho chemickej štruktúre a označovanie podmienok (napr., Fenyl). V našej práci (Kaivarainen, Nezlin, 1967), proteíny označené dvoma iminoxyl radikálmi: 2,2,6,6-tetrametyl-4-amino (N-dichlortriazinu) - R, a imidozolidom (2,2,5,5-tetrametyl -1-oksilpirollin-4-karboxylová kyselina) - R2. V závislosti od podmienok pristúpenia známok mohli komunikovať s lyzín alebo histidín.

EPR spektrum štítkov R, a R2 konjugované pravdepodobne či ziny zvyškov proteínov sa skladala z troch úzkych charakteristického pre slabo immobizirovannoy značiek, bez toho aby dochádzalo Steri-ICALL zakrývať makromolekule. Naproti tomu, tieto spektra EPR spektra imunoglobulínu G, označené R, (pravdepodobne pristúpením histidinových zvyškov) sa skladá z piatich zložiek.
taký spektra ukazujú schopnosť označenie, ktoré sa v dvoch rôznych mikroprostredie - A a B, ktoré sa líšia v mikroviskozity.

Podobnosť EPR spektier IgG a rôzne podjednotky sú zrejme spôsobené spoločný pre všetky tieto konštrukčné prvky, a to, domény, a ich interakcie. Tento predpoklad potvrdzuje skutočnosť, že proteolýza izolované domén L-reťazca A-zložky spektra zodpovedajúce štítku imobilizovaný, úplne zmizne. Je dôležité poznamenať, že v súlade s fyzikálno-chemické a imunochemické metódy pol L-reťazca (domény) zachovávajú svoju základnú priestorovú štruktúru, ktorá je vlastná ne v zložení intaktných L reťazcov.

Pri pokusoch na Interakcia spin-značený Rt Histidinové zvyšky na protilátok s antigénmi izolované s použitím králičie anti-ľudský hemoglobín, protilátku anti-hovädzieho IgG a oslie anti-ľudský IgG. Podľa našich experimentálnych etikiet rotácie boli spojené najmä s Fab fragmentov. Vzor zmien EPR spektra protilátok spin-značený tým, že reaguje s antigénmi nie je závislá na tom, či a vylúči sa zrazenina.

Vo všetkých skúmaných prípadoch, zlúčenie Protilátky spin-značených antigénov za následok zvýšenie pomeru oblasti zložky A do priestoru centrálneho zložky vzhľadom ku kontrolnému ESR spektra. Ďalej došlo k posunu A-zložka zodpovedajúce zvýšenie imobilizačný značky v A stave. Vzhľadom k tomu, oblasť zložky A je daná množstvom štítku v tomto stave, jeho zvýšenie znamená zvýšenie množstva značky v takom stave alebo zvýšenie životnosti tohto stavu.