Štruktúra aktívnych centier protilátok. Štúdium aktívnych miest imunoglobulínov

Hsia a Piette použitia monovalentné a bivalentné spin-značený haptény DMF Skúmali sme hĺbku a rôznorodosť aktívnych miest králičie anti-DNP protilátky. Skúmali závislosť korelácie spin-značené monovalentné DFT-haptén viazaný na aktívne miesto protilátok z Ha + D 1Ds, V - dĺžka haptény, d - je vzdialenosť medzi haptény a štítku, ktorý môže byť zmenený zvýšením uhľovodíkový reťazec medzi nimi.

Ak zmeníte Ha + d od 10 do 12 A Autori pozorovať prudký pokles korelácie časovej pečiatky, ktorá sa potom zmenila len málo. Tento pokles je preto, že Ha + d vo vyššie uvedenom rozmedzí presahuje hĺbku aktívneho miesta a na etikete, pričom sa stáva voľne otáčať. Z toho vyplýva, že hĺbka aktívnych miest je 10-12 A. Podobné výsledky boli získané pri experimentoch s bivalentných haptény.

Keď pridal sa k protilátka bivalentný haptén v prebytku sledovanom ESR spektra je silne imobilná tvorbou dimérov alebo triméru protilátok. Minimálna dĺžka bivalentný haptény, pričom schopnosť viazať dve molekuly protilátok ešte zostal, sa rovnala 21 A. Je zrejmé, že minimálna hĺbka aktívneho centra je 10,5 A.

rozmery protilátky aktívne centrá, Zdá sa, že závisí len málo na druhové špecifickosti. Za použitia rovnakého spôsobu, konzistentné nárast vzdialenosti medzi DFT a odstreďovania značkou, sa ukázalo, že hĺbka aktívnych centier kuracích anti-DFT protilátok a IgA mislomnyh myšou MOPC 315, ktorý má vysokú afinitu k DNP je 10 ± 1 A. Ďalšia skupina autorov skúmanie centrum Fv-fragmsnta proteín MOPC štruktúry 315 pomocou spin-značený haptény, prišla k rovnakému výsledku.

To znamená, že informácie aktívneho hĺbka protilátky centier, získané odstredivým štítku, sú v dobrej zhode s röntgenové analýzy.

Spin-značený haptény boli použité (Willan e a, 1977). Pre porovnávaciu štúdiu aktívnych miest týchto veľkostiach mislomnyh IgA anti-DNP činnosti: MOPC 315, 460 a SIDS XRPC 25. Analýza imunitných komplexov EPR spektrá spin-značené DNP a niektoré jeho deriváty Vzhľadom na tieto haptény stereochémie viedla k nasledujúcim záverom. Hĺbka aktívnych centier troch identických IgA (11-12), ale existujú rozdiely v priečnych rozmeroch centier pri vchode.

Pre XRPC 25 Tento rozmer je 7,5X8 A pre MOPC 460>10X 11 X A "a SIDS 315B>8h11A. Všetky tri proteíny majú väzbové miesta lantanndov La III a Gd III. Interakcia medzi týmito miest a aktívnych centier. MOPC 160 a vzdialenosť 315 medzi kovom a N-O skupina spin-značený haptén asi 10 A, a XRPC - 25 až 20 A.

Magnetická nukleárna rezonancia (NMR), s vysokým rozlíšením (270 MHz) sa aplikuje rovnakej skupiny autorov študovať na aktívne miesto Fv-fragment MOPC 315 (Dower napr. A., 1977). Konkrétne výpočty možné určiť geometriu aktívneho miesta v spojení s haptény DNP, ktorá tvorí van der Waalsove interakcie so štyrmi centrálnymi aromatických aminokyselín.

Bolo zistené, že tieto pásy v spektre NMR, zodpovedajúce fenylalanínu alebo tyrosinových zvyškov, rozšíriť v prítomnosti haptény. Najpravdepodobnejšie vysvetlenie pre toto - pokles pohyblivosti zodpovedajúce zvyšky, ktoré sú schopné pohybovať s frekvenciou asi 104 Hz.