Konformennaya model imunitných komplexov. Interakcia protilátok s antigénmi

Tvar EPR spektier IgG a ich podjednotky, spin-značený rlf pravdepodobne v histidinových zvyškov, môže byť spôsobené z nasledujúcich dvoch dôvodov, a ich kombinácie.
1. Spektra sú výsledkom superpozície dvoch spektier, ktoré zodpovedajú dvom rôznym väzobných miestach rôznymi značkami mikroprostredie.
2. EPR spektrum každej značky určenej schopnosť byť v dvoch rôznych mikroprostredie. Toto vysvetlenie zahŕňa schopnosť Fab fragmentov a dimérov ľahkého reťazca kvartérne zmeny štruktúry v Brownovho pohybe domén. Tak-EPR zložky spektra zodpovedajú kompaktnejšie konformer A (imobilná štítok), a B-súčasti v súlade s menej kompaktná konformeru B (tagy voľnejšie rotácie).

Prvé vysvetlenie nie je uspokojivý, pretože interakcie spin-značené protilátky na antigén nie je iba zvýšenie imobilizácia značiek v A stave, ale tiež k zvýšeniu množstva označených v tomto stave.

Vyššie uvedené experimentálne skutočnosti dobre interpretované pomocou "konformační modelu". Postačuje predpokladať, že interakcia aktívneho miesta s antigénne determinant v dôsledku reorientácie a stabilizácia V-domény rovnovážnej posunu dochádza medzi A- a B-konformery Fab fragmentov za konformerů smere A a zvýšenie jeho kompaktnosť.

Údaj o správnej konformační modelu je zmiznutie Súčasťou ESR spektra spin-značený L-reťazca na ich rozdelenie na dve polovice, r. e. s stratou ich schopnosti byť vo forme A-konformeru.

Už skôr sme navrhli hypotéza, že stabilizácia a domény preorientovania pod vplyvom antigénnych determinant pre vyvolanie zmeny v povahe relatívneho pohybu všetkých ostatných členov domény molekuly IgG (Kaivarainen et al., 1973). To by malo viesť k zmene v konformácii, a to nielen FAB a Fc-podjednotky, ale tiež s ohľadom na zmeny v interakcii medzi podjednotkami. Táto hypotéza je teraz potvrdená štúdií uvedených vyššie, s použitím spôsobu podľa malého uhla rozptylu röntgenového žiarenia a fluorescenčné polarizácie metóda kruhový.

správnosť nášho interpretácia procesy prebiehajúce IgG molekuly za vzniku imunitný komplex s antigénom, sa potvrdzuje aj práca na kinetiku tejto reakcie. Skúmali sme intenzitu a polarizáciu fluorescencie v reakcii medzi haptény fluoresceínu (F) a homológne protilátky (AT) (Levison napr. A., 1975) v statickom režime a spôsobe zastaveného toku. Bolo zistené, že tento proces je v dvoch fázach.

tvorenie medziprodukt komplex v ... T vyznačujúci sa druhého rádu rýchlostnej konštanty, je rýchly a je dokončená v 0,3 sekundy po zmiešaní reakčných zložiek. Proces AT ... T-> AT-G má rýchlostná konštanta prvého poriadku a plne dokončená až po 60 minútach. Druhá etapa vysvetliť pomalé konformační zmenu v molekule protilátky, ktorý môže byť sprevádzaný desorpcia vody. Je zaujímavé, že pomstiť neutrálne ióny zvyšujú rýchlosť asociačná konštanta v súlade s radom Hoffmeistera.

Práce na štúdium kinetiky interakcie IgA myelóm manometer (MOPC 460) s DNP-Lys (Lancet, Pecht, 1976) interpretácia výsledkov je takmer zhodný s predtým nami pre IgG. Autori dospeli k záveru, že molekula (MOPC 460) existovať ako dva konformery na voľný a viazaný na haptén stave.

Haptén väzbové zmeny rovnovážna konštanta medzi konformery. Vo vyššie uvedenej práci dvojstupňovou reakciou je detekovaný - rýchle a pomalé, sú v súlade s našom modeli znamená zmenu orientácie a stabilizujúce variabilné domény (prvý stupeň) a relaxačné proces, čo vedie k rovnovážnej posun medzi A a konformerů B Fab fragmentov na strane kompaktného A -konformera (druhý).