Stanovenie aktivity C systému proteín s

Gén zodpovedný za syntézu proteínu C, je lokalizovaný na chromozóme 2 (ql3-ql4). Hlavnou funkciou tohto fyziologického antikoagulačný je hlavný neenzymatické inaktiváciu koagulačných faktorov (FVA, FVIlla).

Video: Zariadenie na odstránenie toxínov z tela

Pacienti s vrodeným nedostatkom proteínu C, existuje tendencia, aby opakujúce sa trombózy a tromboembólie. Deficit proteínu C sa dedí autozomálne, homozygotov a dvojlôžkové heterozygotes zomrie v ranom detstve od trombózy.

princípom metódy

Metóda je založená na vyhodnotenie aPTT zmesi (zriedenej vzorky BTP, proteínu C deficitné plazmy, proteínu C, aktivátor APTT činidlo). Proteín C sa aktivuje PRP testovaná vzorka činidlom pripraveným Copperhead hadí jed od Agkistrodon contortrix. Aktivovaný proteín C koagulácie ničí faktorov Va a Vila, obsiahnuté v testovanej vzorke zmesi a pridanej proteínu C-deficitné plazmy a tým predĺženie APTT sa zaznamenáva po pridaní chloridu vápenatého. Pri nízkej aktivite proteínu C je exprimovaný mierne predĺženie APTT. Riedenie kalibračná vzorka BTP umožňujú krivku a stanovenia aktivity proteínu C.

Video: oxidy dusíka (NO)

Reagenty a zariadenia

• Proteín C Activator (Protac).
• APTT činidlo.
• Nedostatočná v proteínu C plazme.
• Roztok chloridu vápenatého (0,025 M).
• tlmivý roztok.
• PRP vzorka o známej aktivite proteínu C.
• Coagulometer.

Krvné vzorky pre výskum

Pre stanovenie aktivity proteínu C sa používa BTP.

Neupravené kalibračných vzoriek a skúšobná vzorka sa zriedi roztokom pufra v pomere 1:10.

Vyhodnotenie výsledkov štúdie

Pre konštrukciu kalibračnej krivky vyžaduje BTP vzorku o známej aktivite proteínu S. Pre konštrukciu kalibračnej krivky pomocou zrážania čas v sekundách, získané v štúdii zriedených kalibračných vzoriek so známou aktivitou proteín C.

Interpretácia výsledkov prieskumu

Klinický obraz vrodeným nedostatkom proteínu C je ovládaný rekurentná žilovej trombózy a tromboembólie. Rad pacientov, ktorí mali kožné nekrózu, potrat, a ďalšie. U detí s nedostatkom proteínu C je často pozorované malígny purpura (purpura fulminans).

Získané deficiencie proteínu C môže byť v dôsledku nedostatočného syntéze hepatocytov, zvýšenej spotreby vzhľadom k motoru s vnútorným spaľovaním, liečby nepriamymi antikoagulanciami a iné. U niektorých pacientov s VA pozorovalo nadhodnotenie svojej činnosti.

príčiny chýb

• Chyby Preanalytická fázy štúdie.
• Kontakt s heparínom študovali krv z žilového katétra.

Ďalší analytické techniky

Funkčné aktivita proteínu C amidolytickými určiť alebo koagulačných postupov.

Video: D. Mavrodi Prednáška # 3 "Úloha vylučovacie systémy tretí typ bielkoviny v ..."

Pre stanovenie koncentrácie proteínu C s použitím ELISA, avšak pri porovnaní výsledkov imunologické a funkčné techniky nezodpovedajúce výsledky pozorované u pacientov s molekulárnou abnormality proteín C.

Proteín S Aktivita

Proteín S - vitamín K-dependentný glykoproteín zapojený ako neenzymatické kofaktora aktivovaný proteín C proteolytické degradácii Va a Vila koagulačných faktorov. Gén zodpovedný za syntézu proteínu S, je lokalizovaný na chromozóme 3 v ľudskej polohe pll.l-qll.2. Proteínu S v krvi, je k dispozícii v dvoch verziách: ako voľný proteín (asi 40%) a ako spojená s S4 zložky komplementu (asi 60%). Pokles proteín S činnosť zvyšuje riziko trombózy a tromboembólie.

princípom metódy

Funkčné techniky sú založené na registrovaná závažnosť predĺženie zmes zrážanie proteínu S deficitné plazmy a plazmové študoval pri podaní v aktivovaný proteín C. Skúšobná systém na určenie času zrážania v podobnom testovacom systéme výrobcovia používajú rôzne koagulačné stimulanty (Russell zmija jed, APTT činidla aktivovanej koagulačný faktor IX alebo kolies.). V normálnom obsahom proteínu S pod vplyvom aktivovaného proteínu C spôsobuje významné predĺženie času zrážania (v dôsledku zničenia neenzymatické koagulačných faktorov), zatiaľ čo nedostatkom proteínu S sa vyjadruje oveľa slabšie (v dôsledku neúčinné ničenia neenzymatické faktorov aktivovaných proteín C).

Reagenty a zariadenia

• Proteínu S deficitné plasma.
• Aktivačné činidlo (fosfolipidy, Russell zmija jed alebo iné aktivátory, heparín neutralizačné činidlo, atď).
• Aktivovaný proteín C.
• Roztok chloridu vápenatého (0,025 M).
• tlmivý roztok.
• PRP vzorky so známym obsahom proteínu S.
• Coagulometer.

Vzorky krvi pre štúdiu stanovenia aktivity proteínu S pomocou PPP.

Potom sa zmes pripravená a skúmané BTP vzorky roztoku pufra boli zriedené v pomere 1:10.

metódy stanovenia

Priebeh stanovenie aktivity proteínu S sa výrazne líši od použitia činidiel a zariadení rôznych výrobcov, takže akčné sekvencie laboratórne lekár musí striktne dodržiavať dokumentácie k kitu reagencií a prispôsobiť ho na existujúce laboratória v koagulometru.

Vyhodnotenie výsledkov štúdie

Štúdia koagulačný čas zriedené vzorky PRP so známou koncentráciou proteínu S umožňuje vytvorenie kalibračnej krivky pre stanovenie aktivity tohto fyziologického antikoagulačný percent normálu.

U zdravých ľudí, aktivita proteínu S v rozmedzí 60-130%.

Interpretácia výsledkov prieskumu

Vrodená deficiencia proteínu S - vzácna porucha antikoagulant hemostázy. Prvý popis nedostatkom proteínu S bol zavedený v roku 1984 NR Schwarz a kol. Klinický obraz ochorenia dominuje rekurentná flebotrombóza a tromboembólie. Podobne ako mnoho iných vád antikoagulačnej hemostázy, táto patológia sa prenáša autozomálne. Pre rozlíšenie medzi tromi typmi vrodeným nedostatkom proteínu S.

Možnosti vrodený nedostatok proteínu S

• Typ: metóda I koalícia: Snizhen- voľný proteín S: Proteín Celkový Snizhen- S: Znížená.
• Typ: Metóda II koalícia: Snizhen- voľný proteín S: Normalizácia Celková bielkovina S: Norm.
• Typ: Metóda III koalícia: Snizhen- voľný proteín S: Proteín Celkový Snizhen- S: Norm.

Typ Aj je charakterizovaný nízkym obsahom proteínu S použitím rôznych prevedení, imunologické stanovenie, ako aj znížiť jeho funkčnú aktivitu. Pri type deficit II pozorovaný pokles funkčnú aktivitu, však, celkový a voľný S proteínová frakcia nebudú poškodené. Typ III je znázornené kombinované zníženie funkčnej aktivity bez proteínu S a jeho frakcie. Tak, pre identifikáciu typu nedostatkom proteínu S je nutné použiť koagulácie a imunologické metódy na jeho stanovenie.

V klinickej praxi je oveľa bežnejšie získaný deficit proteínu S. zníženú aktivitu proteínu S sa nachádza v nefrotického syndrómu, tehotenstvo, estrogénové terapia, L-asparagináza, a ďalšie. U detí s nedostatkom proteínu S pozorované malígny purpura (purpura fulminans).

príčiny chýb

• Heparín z žilového katétra.
• Hemolýza v testovanej vzorke krvi.
• Nesprávne dávkovanie citrátu, keď sa vezme krv.

Ďalšie analytické techniky úplne rozšírený spôsob založený na použití testu ELISA pre stanovenie voľného proteínu S a S4 spojené so zložkou komplementu. Tiež je opísaný (ale nie je na trhu) funkčné spôsobe stanovenia tohto antikoagulans, založený na použití chromogénnych substrátov.