Diagnostika izolovaných blastoméra. Diagnostické Patológia v štádiu blastocysty.

Diagnóza izolovaných blastoméra To vám umožní získať presné informácie o plode genotypu. V podstate 1-2 blastoméra biopsia sa vykonáva v kroku 8-10 embryí na bunku. Od začiatku stupňoch drvenie všetkých totipotentné blastoméra (tj. Vzájomne zameniteľné), odstráni niekoľko buniek nemá vplyv na ďalší vývoj embrya. Metodická analýza jednotlivých blastoméra z embryí prinschEgshalno nelíši od analýzy polárnych orgánov.

Voľba molekulárnej diagnostiku určuje špecifickú mutácií skúmané a zahŕňa ako PCR pre súčasnú detekciu viacerých mutácií (multiplexové PCR), a zložitejšie DNA. Ich použitie umožňuje diagnostikovať najčastejšou autozomálne recesívne monogenní ochorenia - cystická fibróza, thalassemia, spinálnej svalová atrofia, Tay - Sachs choroba a autozomálne dominantné - myotonická dystrofia, Marfanov syndróm, Huntingtonova chorea a X-viazané - Duchennova svalová syndróm dystrofia a Krehké X chromozóm.

Cytogenetická diagnóza preimplantačnej vykonáva 1-2 blastoméra FISH metóda za použitia DNA sond špecifických pre pericentromeric oblasti chromozómov 16, 18, 21, 13, X, Y. V prípade heterozygotných nosič translokácia jeden rodič pokusov tselnohromosomnyh za použitia DNA sond.

Problém diagnóza geteroploidii sťažené vysokou frekvenciou chromozómových mozaicismu v skorých štádiách embryogenézy človeka. Ukázalo sa, že 38 až 46% morfologicky normálnych embryí na 8-10 buniek fáze majú tri alebo viac blastoméra aneuploidní. Počet blastoméra, ktoré sa líšia v počte a sadu chromozómov, môže dosiahnuť polovica všetkých zárodočných buniek. Vzhľadom k tomu, uzavretie na základe analýzy 1-2 buniek, ktoré nie sú plne odrážať stav chromozomálne embryá tvoriaci vzhľadom k vysokej frekvencii abnormálne segregáciu chromozómov počas drvenia zygota diagnostiky pravdepodobnosť chyby je vysoká. Preto DD možno odporučiť v prípade vysoko rizikových (25-50%), narodenie dieťaťa s dedičným ochorením.

Diagnóza v štádiu blastocysty Je to jeden zo sľubných oblastí DD. Na štádiu blastocysty embryá sa skladá z približne 60 až 100 buniek. Pri renderovanie trofo- embryoblast a bez vplyvu vývoja embrya možno odstrániť až 10 trofoblastu. Všimnite si však, že in vitro kultiváciu embryí in vitro fertilizácia (IVF) sú zriedka priviedol do štádia blastocysty, ako schopnosť týchto embryí pre implantáciu, môže byť podstatne znížená. V rovnakej dobe, frekvencia normálnych embryí morfologicky mozaika forma numerické chromozómové aberácie je dostatočne vysoká a dosahuje 40%.

To znamená, že hlavné (a jediný) výhoda preimplantačnej diagnostiky je možnosť transplantácie geneticky vysoko kvalitných embryí. Nevýhody tohto prístupu sú: metodické ťažkosti spojené s potrebou pracovať s mikroskopickými množstva materiálu, čo obmedzuje rozsah diagnostické programy WKO a väčšia pravdepodobnosť chybnej diagnózy v dôsledku zložitosti analýzy jednotlivých buniek. Vyhliadky pre analýzu veľkého počtu buniek, samozrejme zvýši metód riešenia DD. Avšak, dokonca aj pri analýze viacnásobné bunkovej chromozomálne mozaiky trofoblastu problém vyriešený, a preto, nevylučuje potrebu pokračovacie PDP fázach poimplantačnej.

Na záver možno konštatovať, dva hlavné okolnosti obmedzujúce Vývoj diagnostiky preimplantačnej v Rusku. Po prvé, tieto štúdie, a to aj v tých najrozvinutejších národných centier asistovanej reprodukcie sú stále vo fáze vedeckého rozvoja. To znamená, že potom, čo DD a nástup dlho očakávané tehotenstva po transplantácii prevádzkovaný po implantácii embrya na stupňoch vhodné PD štandardných metód.

Po druhé, preimplantačnej diagnóza je nemožné bez prítomnosti vysoko presné zariadenie pre molekulárnu a cytogenetických štúdií, presných postupov pre mikrochirurgické operácie vajíčok a blastocysty, vysoko kvalifikovaných odborníkov - cytogenetice, molekulárnych biológov a embryológ, a samozrejme, špeciálne vysoko kvalitné činidlá, vrátane chromozómov a lokus-špecifické DNA sondy a spotrebný materiálov. Ako výsledok, DD, samozrejme, výrazne zvyšuje už tak vysoké náklady na IVF a zneprístupní pre ruského ľudu.