Toksoplazminom imunomodulácie v liečbe chronickej toxoplazmózy

Toxoplazmóza - prvoky zoonóza s latentným preimuschestvennohronicheskim nad tečúcou znaky porazheniyanervnoy systému orgánov retikuloendoteliálneho systému, cross-polosatoymuskulatury a orgánu videnie.

Patogén - Toxoplasma gondii - obligátne vnutrikletochnyyparazit so zložitým životným cyklom, v ktorom muž a bolee300 druhov zvierat a vtákov sú to medzihostitelia.

Naliehavosť toxoplazmóza štúdie je daná predovšetkým, lepenie tejto patológie s imunodeficienciou (infekcia odlišností HIV). Ďalej opisuje vodné a jedlé vspyshkizabolevaniya [7]. S ohľadom na vysokú mieru infekcie v populácii (od 20 do 90% v rôznych regiónoch sveta) a polietiologichnostimmunodefitsitov (vrátane dlhodobej glukokortikoidy, cytostatickej terapie, vystavenie ionizujúcemu žiareniu it.d.), je potrebné študovať príčiny reaktivácie latentnoprotekayuschego procesu.

Je dokázané, že prietok charakter je určený toxoplazmóza sostoyaniemimmunnoy mikroorganizmov systém [2]. Akútna toxoplazmóza (OT) sa vyvíja v dôsledku primárnej infekcie mikroorganizmom toksoplazmamineimmunnogo [4]. Vyvíjajúci sa pri teplote miestnosti a reakcia kompleksprisposobitelnyh makro- a mikro-organizmus zakanchivaetsyaformirovaniem nesterilné imunitu.

Dlhodobé pretrvávanie činidlá sprevádzané "plávajúca" koncentrácia špecifických protilátok produkovaných klon pamäťových lymfocytov antigén spetsificheskihV [1]. Táto fáza ochorenia nazyvaetsyahronicheskim toxoplazmózy (HT), a je prirodzený proces iskhodomostrogo.

Dostatočné množstvo pamäte T- a klinické prejavy ochorenia obuslovlivaetotsutstvie B buniek (latentný techenieHT). Avšak, v niektorých prípadoch (1-5% nakazených) proiskhoditreaktivatsiya latentnú infekciu [3]. Táto kategória zahŕňa "s oslabeným imunitným systémom" osoby, vrátane sekundárneho imunodeficitu (HIV infekcie a iatrogénnou - nekontrolované antibiotikum, cytostatickej, glukokortikoidy, atď.).

Je známe, že hlavnú úlohu v prevencii aktivácie latentnogoHT patrí bunkové zložky imunitného systému. Olovo prevencia zvenomv reaktivácie syntézy je významná kolichestvainterferona-gamma (IFN-yg), T-lymfocyty citlivé Toxoplasma antigény [5].

Od roku 1958, Klinika infekčných chorôb RossiyskoyVoenno lekárskej akadémie uskutočnila výskum razlichnyhaspektov HT. vložený AP Kazantsev (1961) Metóda spetsificheskoydesensibilizatsii toksoplazminom dosahuje odolný proti remissiiu 90% pacientov po jednom kurze. Avšak iba posledniegody, možnosť študovať imunitný sistemybolnyh chemoterapiu so zodpovedajúcimi imunologickými metódami.

Účelom tejto štúdie

Vedecké odôvodnenie toksoplazminom mechanizmus účinku na zhodnotenie osnovaniikompleksnoy klinických laboratórií a immunologicheskogomonitoringa pacientov s chronickou toxoplazmózu.

Materiály a metódy

Do štúdie bolo zahrnutých 70 pacientov s klinickými prejavmi obostreniyaHT (Reaktivácia latentnej HT). Diagnóza naosnovanii Prítomnosť klinickej období exacerbácie isklyucheniyadrugih sindromoskhodnyh ochorenia infitsirovannnostitoksoplazmami detekcie (prítomnosť špecifických Ig G, Toxoplasma, analýza vyyavlennyhimmunofermentnym) zamedlennogotipa výrazný precitlivenosť na antigény Toxoplasma následok intradermálne probys toksoplazminom zriedi 10 krát 0,85% hloridanatriya sodného. [Toksoplazminom predstavuje komplexné antigény bunkovej membrány naruzhnoypoverhnosti T. gondii (Kmeň RH) belkovoyprirody (t. N. SAG), získaný vody a extrakciou éterom (rastliny Odessa na výrobu bakteriálnych prípravkov).]

Všetci pacienti odmerané množstvo CD-4 +, CD-8 +, B-IgG + (monoklonalnymiantitelami podľa L.A.Kozhemyakinu et al., 1987), Ig G Toxoplasma (test ELISA-systém "La Roche"), obor RTML s toksoplazmennymantigenom (George et Vaughan, 1962 Bulankovas modifikácie YI a kol., 1993), "aktívny" interferón (ďalej - IFN-zákon), "aktívny" interferón-gamma (ďalej - IFN-g-act) a "aktívny" interferón-a (IFN-y ďalej-AKT) biologická metóda. Takzheopredelyali celková koncentrácia IFNg(Ďalej - IFNg-Spoločnosť) a interleukín-4 (ďalej len - IL-4) pomocou ELISA za použitia komerčných testov analizas Systems Ltd. "proteín obrys" (Petrohrad) a "cytokín" (Petrohrad). Chuvstvitelnostmetoda bola 10 pg / ml. Naviac (kontrolná skupina) boli skúmané 10 pacientov bez klinických prejavov toksoplazmozav histórie (latentnú forma HT).

Všetci pacienti boli rozdelení do skupín podľa effektivnostyuterapii. Skupina 1 - 58 pacientov s prechodom latentnuyufazu ochorenia (cyklické formy pre symptomatické chronické toxoplazmóza), skupina 2 - 12 pacientov s opakovaným exacerbácia HT pre blizhayshegogoda po ošetrení (za recidivujúcich foriem symptomatickej hronicheskogotoksoplazmoza). Kontrolná skupina - 10 klinicky zdravé prítomnosť litss Ig G na Toxoplasma (pre primárnu latentného ochorenia) .Gruppy porovnateľné pohlavia, veku, harakterupitaniya, spoločenské postavenie, premorbid pozadia.

Vyšetrenie pacientov bolo vykonané v dynamiky v akútnej, priamo po imunomodulačnej toksoplazminom (intradermálne na riedenie sa zvyšujúcou sa koncentráciou obscheydoze 0,3 ml natívneho liečivá), a 4 týždne po ošetrení okonchaniyakursa. V žiadnom prípade nebola pozorovaná bočné podávanie reaktsiyna toksoplazminom. Podrobnosti o aplikačných metód liečenia chemoterapiou toksoplazminav opísané v [1]. Indikátory imunitných buniek, koncentrácie aktívneho interferónu skúmal aj v 3-6 mesyatsevposle liečbe.

Štatistická analýza výsledkov pomocou programu "Statgraphics profesionálny Win, ver. 3.0 "pomocou jedinej a mnogovariantnogoanaliza Analýza podskupiny (analýza podmnožín), porovnanie dvoch vzoriek (parametrické a Neparametrické), a faktor poshagovyyanaliz (p <0,05, F-k-vstúpiť = 4).

výsledky výskumu

Bolo zistené, že v období exacerbácie (tabuľka 1) u pacientov s významnými zmenami HTnablyudayutsya immunologicheskihpokazateley študovaná (tabuľka X - priemerná veľkosť, d - standartnoeotklonenie).

Tabuľka 1. Niektoré indikátory stavu imunity u bolnyhhronicheskim toxoplazmózy počas akútneho ochorenia

* - p<0,05, ** - p<0,01 (сравнение с контрольной группой).

A tak, aj napriek nedostatku spoľahlivých štatistických pacientov razlichiyu s cyklickým priebeh ochorenia v porovnaní s recidivujúcim, najprv pozorovaná výrazne vyšší obsah CD-8 + neskolkobolshee počtu B-lymfocytov, ktoré produkujú Ig G (ďalej len - B-IgG +). Tiež zvýšená koncentrácia špecifické Ig G (ďalej Ig G tox), IFN-akt, IFN-rea IL-4. Tiež poukazuje na absenciu IFNg-akt, tým nižšia je koncentrácia IFNg-Spoločnosť ipokazatelya RTML.

V porovnaní s ukazovateľmi imunitného stavu s formeHT latentnou obdobia exacerbácie (opätovné) počas cyklického harakterizuetsyastatisticheski významné zvýšenie množstva CD-8 +, IFN-akt (p<0,05), снижением количества B-Ig G+ (p<0,05), общегоIFN-g (p<0,01) и Ig G tox (p>0,05), а также ростоминдекса РТМЛ (на 15 %). У пациентов данной группы не обнаруживалсяв сыворотке крови активный IFN-g (как и при латентном токсоплазмозе).

Imunitný systém pacientov s akútnym sretsidiviruyuschim priebeh chemoterapie sa vyznačuje menším počtom vyrazhennymuvelicheniem CD-8 + (p<0,05) и активного IFN-акт (p>0,05),более заметным снижением количества B-Ig G+, Ig G tox, IFN--akt (p<0,05), наличием в сыворотке IFN-g-akt, k prudkému poklesu IL-4 a RTML rastu 28%.

Tabuľka 2. Niektoré indikátory stavu imunity u bolnyhhronicheskim toxoplazmózy po ošetrení toksoplazminom

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ)

Tabuľka 3. Niektoré ukazovatele imunitným stavu toxoplazmózy bolnyhhronicheskim 1 mesiaca po ukončení liečby.

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ).

Tabuľka 4. Niektoré indikátory stavu imunity u bolnyhhronicheskim toxoplazmóza 3-6 mesiacov po ukončení liečby.

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ)

Analýza dát v tabuľkách 2-4 ukazuje, že spolu s bežnými skupinami pacientov dlyaobeih HT mení imunitný systém nablyudalissuschestvennye študoval rozdiely v dynamike ukazovateľov narastayuschievo času.

Ihneď po imunomoduláciu vo všetkých patsientovnablyudali rastu IFNg-akt, IL-4 (boleevyrazhenny pri cyklickom priebehu choroby), redukcia CD-4 + 8 + -iCD. Avšak, v prípade, že cyklický priebeh ochorenia CD-4 + snizhalisna 5%, a CD-8 + - 11%, keď recidivujúce chodoch zaregistrirovanaobratnaya trend: CD-4 + sa zníži o 25%, a CD-8 + - 10% .Tieto zmeny sprevádzal multidirectional dynamikou IFN-g-Society: jej koncentrácia sa zvýšila o 85% v priebehu pritsiklicheskom HT a znížil o 38% u pacientov s ochorením retsidiviruyuscheyformoy.

Do jedného mesiaca pacienti študovali skupinovej dynamiky pokazateleyIS získať väčší rozdiel. V cyklické prúdenie bolezniprodolzhalsya číry (40-120%) zvýšenie koncentrácie IFN-g-IFN a pôsobíg-Spoločnosť, vozrastalokolichestvo CD-4 + na hodnotu vyššiu ako doba exacerbácia, nablyudalosdalneyshee zníženie počtu CD-8 +, bolo preukázané zníženie IL-4. V rovnakej dobe, u pacientov s relaps rast chemoterapii CD-4 + sprevádzalo zvýšenie CD-8 + (30%). Neznachitelnyyrost koncentrácia IFN-g-spolu (1%) z týchto pacientov bola spojená s uvelicheniemkontsentratsii "aktívne" formy IFN (ich hodnota sa zvýšila o 10%).

Pacienti oboch skupín bola pozorovaná jednosmerný dinamikakontsentratsy B-Ig G + a Ig G tox (zníženie počtu lymfocytov, produtsiruyuschihIg G a koncentráciu špecifických imunoglobulínov).

Zvlášť pozoruhodné sú výsledky komplexu (klinické a imunologické) vyšetrenie pacienta do 3-6 mesiacov po ukončení liečby.

Z prieskumu vyplýva pacientom zjavne foriem HT cherez6 mesiacov po priebehu liečby ukazujú, že

1. Pri jazde na bicykli priebeh choroby (jednorazový kurz terapiiprivodit stabilný remisii ochorenia - prechod ochorenie vhronicheskuyu latentnej forme), je takmer kompletný klinicheskayaremissiya - miznú sťažností prejavy poraziť retikuloendotelialnoysistemy tela izoluje sociálnu adaptáciu pacientov.
2. Dynamika klinických prejavov chemoterapie priamo koreluje s rostomCD-4 +, IFNg-akt (pozitívne) a index vyrazhennymsnizheniem RTML s toksoplazminom (negatívne). RostuCD-4 + zodpovedá úmerný nárast množstva CD-8 +, zvyšuje koncentráciu Ig G Tox. Najviac študoval immunologicheskihpokazateley nijako nelíšia od tých v latentnej forme chemoterapie.
3. Recidivujúce samozrejme zjavné formy HT v týchto podmienkach obsledovaniyaharakterizuetsya zachovanie disadaptative reakcie (znížený funkčný kapacita, vyjadrená emočné nestabilitu, existujú objektívne priznakiotsutstviya remisie), prudký nárast počtu CD-8 + povtornymuvelicheniem index RTML antigény Toxoplasma, snizheniemkontsentratsii Ig G tox, nízke koncentrácie aktívneho interferónu ,

diskusia

Štúdie ukázali, že imunitné procesy, ktoré prispievajú ku klinickým prejavom reaktivácie chemoterapie harakterizuyutsyaopredelennymi rozdiely u pacientov s pretrvávajúcou polozhitelnymeffektom imúnny a pacientom s relapsom formy dannoyklinicheskoy ochorenia.

V spojení s dostupnými k dnešnému dňu, v literatúre údajov, výsledky svojho vlastného výskumu nám umožňujú ponúkať obyasnenienekotoryh prejavy infekcie získané toxoplazmózy.

Je známe, že hlavným prvkom latentnogotoksoplazmoza proti opätovnému je syntéza vysokej hladiny IFN-g, ktorá bráni zrútenie cýst. Tento yavlenieizucheno experimenty [6]. Je tiež ukázané, že pri konkrétnej latentnomtoksoplazmoze CD-4 + vylučujú ako IFNg,a IL-4, ktorá je charakteristická pre Th0 buniek [9].

V niektorých štúdiách sa experimentálne preukázalo, že infitsirovaniemakrofagov Toxoplasma vedie k zníženiu expresie molekulklassa MHC-II a IFN-g-závislé prezentácie MHC-I, mozhetyavlyatsya, že jedným z faktorov, ktoré určujú perzistencie vozbuditelya.Takzhe ukazuje, že reaktivácie latentnej infekcie v eksperimentevazhnaya úloha pre CD-8 +, ktoré lyžujú infitsirovannuyukletku, ale neničí seba Toxoplasma [4,8].

HT ostrenie mechanizmus môže byť reprezentovaný nasledujúcim obrazom.Na rozvoj pozadí imunosupresie zníženú koncentráciu IFNg(V dôsledku priamej inhibičné pôsobenia alebo syntézy rezultateistoscheniya). Znížená IFN-g môže viesť k spetsificheskihTh0 transformáciu do Th2, ktorá vedie k hornej časti cytolýzy buniek infitsirovannyhtoksoplazmami (pseudocysty). Prichádzajúce extracelulárne prostranstvoparazity čiastočne lýze špecifických protilátok v prisutstviekomplementa. Časť patogénov vystavených fagocytózy, nosyaschemunezavershenny charakteru. Vnútri patogén formy sobstvennuyuobolochku buniek, inhibuje funkciu prezentujúca antigén, a tým vytvára podmienky pre jeho ochranu, pretože aj v bunkách sluchaelizisa zostáva nažive. Tento proces je podporovaný zaschet chronický nedostatok IFNg. Možné vratnosť Podmienkami imunodeficiencie spontánnej remisie, ak je koncentrácia IFNg zvýšenie, bude iimmunny reakcia byť vykonaná do Th1-typu. V prípade, že uglubleniyaimmunodefitsita (AIDS), Th1 ovládanie je úplne stratený, ochrana funktsiyunespetsificheskoy predpokladať, neutrofily a odpoveď aktiviruetsyaTh2. Výsledkom je, že rozvoj polyklonálna aktiváciu nešpecifických protilátok hyperproduction B-limfotsitovs, čo vedie k vývojovým generalizatsiiinfektsii parazitné sepsa (meningoencefalitídy, abscesy, zápal pľúc, hepatitída, myokarditída, atď.).

Vo väčšine prípadov (90%) toksoplazminom slúži ako spetsificheskogoimmunomodulyatora, ktorého mechanizmus účinku je pravdepodobne svyazans aktivácia produkujú IFN-g špecifické CD-4 +. V tomto mehanizmasvidetelstvuyut favorizujú rast CD-4 + a koncentráciou IFNg,a absencia významných dynamiky humorálnej zvenaimmuniteta. Antigén je podaná intradermálne pravdepodobne sorbiruetsyana antigén prezentujúcich buniek, kože, spracovaných a predstavlyaetsyaya-pomocné bunky, ktoré reagujú na to generácia IFN-g dopolnitelnogokolichestva. Na druhej strane, IFNgstimulované Th0 transformácie do Th1. Tak prekraschaetsyatsitoliz buniek infikovaných s pseudocysty už vytvorených a v neprítomnosti druhej sa nachádza vo vnútri bunky toksoplazmyunichtozhayutsya aktivuje IFNg makrofágy.

Približne 10% prípadov nevedie k zavedeniu toksoplazminom krazvitiyu stabilný remisii. Relatívne vysoká počiatočná urovniIFN-g (Vrátane aktívnych IFN-g) môže odrážať skutočnosť, že títo pacienti otsutstvuettochka jeho aplikácie (neexprimujúcich receptor). Snizheniekolichestva CD-4 + a IFNg dopolnitelnoyantigennoy na zaťaženie na pozadí, následný rast CD-8 + hronicheskihvirusnyh typické pre infekciu (napr., chronická vírusová hepatitída). Avšak, v tomto prípade je neúplný charakter cytolýze a mikrobitsidnayaaktivnost makrofágy, zrejme nezvyšuje.

Schopnosť imunitných buniek k syntéze IFN-g pod vplyvom špecifických antigénov stimulyatsiiopredelyaet a predpovede ďalší priebeh chemoterapie. Ukázalo sa, že uvseh bez výnimky, pacientov s cyklickým priebehu ochorenia, 4 týždne po ošetrení sa úroveň celkového toksoplazminom IFNgprekročil originál, v opakujúce sa HTV v priebehu tejto doby koncentrácie celkového IFNg80% pacientov sa znížila.

Je zrejmé, že interferón hrá dôležitú úlohu v procese reaktivatsiilatentnogo toxoplazmózy. Mechanizmus relapsu chemoterapii, asi zložitejšie, o čom svedčí koreláciu dynamiky klinických ukazovateľov proyavleniys RTML s Toxoplasma antigény. RTML yavlyaetsyaintegrativnym Index ukazujúci immunokompetentnyhkletok interakciu s cytokínov produkovaných by museli mnogoobraznymiodno- a mnohostranného biologické účinky. Čisté pacienti polozhitelnayadinamika sa stabilným ochorením v prechode remissiyui znovuobjavenie akútnych symptómov v iných kategoriipatsientov sa časovo zhoduje s zjavné rozdiely pokazatelyaRTML. Po 3-6 mesiacov po ukončení liečby sa sensibilizatsiisnizhaetsya do prvej skupiny a zvyšuje v druhom.

zistenie

1. V patogenéze akútnej exacerbácie chronickej toxoplazmózy chelovekaodnim z popredných faktorov je zníženie hladiny IFN-g a súvisiace aktiváciu Th2 odpovede.
2. V 90% ďalšej antigén záťaže s vnutrikozhnomvvedenii toksoplazminom vedie k stimulácii IFNg,Mikrobicídna aktivácia mechanizmov makrofágy zastavenie tsitotoksicheskiheffektov, obnovenie tolerancie a transformácie zabolevaniyav latentné formu po zapnutí Th1-odpovede.
3. Významne nižšia (10%) špecifických antigénov nagruzkane vedie k zapnutiu Th1-odpovede, ktorá môže byť svyazanos genetické defekty, ako je IFN-g výroby, a mechanizmy na jeho realizáciu biologicheskiheffektov.
4. Toksoplazminom (antigén Toxoplasma) je spetsificheskimimmunomodulyatorom, hlavný mechanizmus pôsobenia je stimulácia syntézy svyazanso IFN-g proliferáciu prvého typu antigén-špecifických T-helperov1.

Referencie

1. Lobzin JV, Bulankov Yu Kazantsev AP, Vasiliev V.V.Hronichesky toxoplazmóza: racionálne terapie. / Rossiyskiemeditsinskie olovo. Časopis pre klinitsistov.- 1997. - N 2.- t 2 -. S. 67-69
2. Beazley D. M., Egerman R., S. Toxoplazmóza // Semin. Perinatol.-1998. -VOL. 22, № 4. -P. 332-8.
3. Bossi P., Caumes E., Astagneau S., Li T. S., Paríž L., MengualX., Katlama C, Bricaire F. Caractéristiques epidemiologiquesdes toxoplasmoses cerebrales chez 399 pacientov infectes parle VIH suivis entre 1983 a 1994 / Rev. Med. Interne.-1998 máj -Vol.19, №5. -P. 313-7
4. Darrel O., Ho-len, Alex W.L. Joss. Human toxoplazmóza. -New YORK-: University Press, 1992. - 432 s.
5. Denkers E. Y., Gazzinelli R.T. Regulácia a funkcie T-buniek v priebehu mediatedimmunity Toxoplasma gondii / Clin. Microbiol.Rev. -1998. -VOL. 11. №4. -P. 569-88
6. Hunter C. A., Subauste C. S., Remington J.Š. Úloha cytokinesin toxoplazmózy / Biotherapy. -1994., -Vol.7, №№3-4. -P. 237-47
7. Isaac-Renton J., Bowie W. R., Kráľ A., Irwin G. S., Ong C. S., Fung C. P., Shokeir M.O., Dubey J. P. Detekcia Toxoplasma gondii oocýst v pitnej vode / Appl.Environ. Microbiol. -1998. -Vol.64, №6. -P. 2278-80
8. Luder CG, Lang T., Beuerle B., Gross U. dole regulationof molekúl MHC triedy II a neschopnosť až regulovať triedené molekuly v myších makrofágov po infekcii Toxoplasma gondii / Clin. Exp. Immunol. -1998., Sv. 112, №2. -P. 308-16
9. Prigione I., Facchetti P., Ghiotto F., Tasso P., Pistoia V.Toxoplasma gondii špecifické CD4 + T bunkovej klony od zdravých, latentne infikovaných ľudí zobrazenie Th0 profil sekrécie cytokínov / Eur. J. Immunol. -1995. -VOL. 25. №5. -P. 1298-305