Stanovenie hladiny LH a FSH. analýzy

Vývoj vysoko špecifické immunoanalizatorov na stanovenie koncentrácie gonadotropínmi To bolo spojené s ťažkosťami kvôli vysokej homológie glykoproteínové hormóny a podjednotky nevyhnutné pre oddelenie voľného a neporušený hormón. Skrížená reaktivita s a-podjednotky tiež presné meranie nemožné hladiny LH a FSH metódou RIA za použitia polyklonálnych protilátok. Ďalej je známe, mikroheterogenity gonadotropínmi umiestnené ako v hypofýze a v voľného pohybu vzhľadom k rôznym stupňom glykozylácie.

variabilita oligosacharidov komponenty a tiež spôsobuje všeobecnú štruktúru náboje mikroheterogenity proteínu, ktoré vedie k vzniku srvátky izoforiem electrofocussing oddeliteľné pri pH v rozmedzí 6,5-10,0. Aj keď je klinický význam tohto mikroheterogenity cirkulujúcej izoformy zostáva neznámy, ovplyvňuje imunoreaktivita na stanovenie ich koncentrácií za použitia rôznych protilátok, čo vedie k variabilite výsledkov rôznych imunologických testov.
microheterogeneous tiež ovplyvňuje biologickú aktivitu, čo vedie k nesúladu výsledkov imunologických a biologických testoch.

Ďalším problémom je nedostatok vhodných referenčných prípravkov pre imunologické a biologické testy. Medzinárodná Referenčná príprava (MEP) prečistené ľudské menopauzálny gonadotropín (hMG), odvodený z moču ( "druhá hMG MEP"), bola schválená Svetovej zdravotníckej organizácie (WHO) je široko používaný pre väčšinu imunologických a biologické testy. Charakteristika IEP zavedené biologické skúšky, boli základom všetky následné výrobe vyčistených prípravkov hypofýzy napríklad medzinárodné normy (MS), WHO ( "druhá MS"). Najväčší priemysel produkuje analyzátory sú štandardizované na "druhej čs."

Avšak, aj keď na obrázkoch biologická aktivita a štandardizovaná v súlade s MEP alebo MC imunoreaktivita rôznych panelov pre analýzu sa líši v závislosti na špecifických protilátok v nich používaných.

V posledných rokoch bol vyvinutý Dvojstupňový spôsob zameraný IRMA (IRMA), alebo immunohemilyuminestsentnogo (Icha) analýza pas na báze použitie dvoch monoklonálnych protilátok. Tieto techniky umožňujú obísť mnoho nevýhod RIA. Všetky testy sú automatizované a extrémne presný - chyby sa blíži 0,1 mIU / ml. Navyše, ich výsledky nie sú ovplyvnené prítomnosťou voľne a subednnits a lepšie korelujú s Biotest. Vzhľadom k svojej vysokej citlivosti, môžu byť tieto skúšky vykonať na začiatku dospievania detekovať malé koncentrácie hormónov.

V Biotest PH použité rozptýlené Leydigove bunky myší / potkanov a leydigomy línie (MA-10), bunky v kultúre a in vitro produkciu testosterónu meranej. Tieto testy vyhodnotiť biologickú aktivitu cirkulujúceho LH za fyziologických podmienok. To je dôležité, pretože biologická aktivita LH sa mení s abnormálnymi poruchami glykozylácie a jeho terciárne štruktúry molekuly. Kombinácia biologické skúšky a RIA umožňuje vypočítať pomer bioaktivitu a imunoreaktivity, čo dobre odráža index kvantitatívnych zmien LH molekuly.

Napriek skutočnosti, že profily LH bioaktivita a imunoreaktivita, majú tendenciu byť úzko koreluje s radom fyziologických zmien, za určitých patologických stavov, existujú podstatné rozdiely medzi nimi. Napríklad inaktivačné mutácie FGR-podjednotky génu vedie k zvýšeniu imunoreaktivity LH, ale významne znižuje jeho biologickú aktivitu. V biologických testoch pre stanovenie aktivity FSH in vitro za použitia granulosa bunky, alebo krysa Sertoliho buniek, ako je merané cAMP produkcia alebo aktivity aromatázy v reakcii na stimuláciu s FSH. Citlivosť týchto skúšok je asi 2,5 mIU / ml. Napriek skutočnosti, že in vitro biologické skúšky majú nejakú hodnotu pre štúdium fyziológie hormónov, ich rutinné klinické použitie je problematické vzhľadom na zložitosť a významných časových nákladov.

meranie hladiny FSH a LH používa v diagnostike funkčných porúch pohlavných žliaz. Zvýšená koncentrácia FSH je zvyčajne pozorovaná, keď ovariálne zlyhanie, ale tiež sa vyskytuje u pacientov s životaschopných folikulov. Občas gonadotropíny zvýšenie hlasitosti gonadotropinsekretiruyuschimi spojené s nádormi hypofýzy alebo ektopických nádorov gonadotropinprodutsiruyuschimi.

Ak sa u pacienta s amenorea ukázalo zvýšenie LH pri normálnej FSH s LH pomer FSH / >2 (bežné, ale voliteľná funkcia), môže sa predpokladať PCOS. Nízke hladiny týchto hormónov dochádza v hypofýze a hypotalamu dysfunkciu a v kombinácii s poklesom hladiny estradiolu. Pre vyhodnotenie hĺbkového hypofýzy rezervy je nutné vykonať provokačný skúšky s GnRH. Koncentrácia LH a FSH stanovená po 20 a 60 minút po intravenóznom podaní 100 mg GnRH. Zlyhanie odpovede na zavedenie GnRH dochádza v hypogo- gipogonadizme- ale citlivosť a špecifickosť tohto testu je provokatívny nízka u pacientov liečených exogénny pohlavných hormónov.

Video: Koklyaev: PKT # 1 [Testy po kurze]