Vlastnosti protilátkou mRNA. MRNA štruktúra imunoglobulínov

pokiaľ ide o pridelenie Čisté mRNA prípravky je umožnené zvoliť priame štúdium ich fyzikálnych a chemických vlastností a štruktúry. Ihneď bolo zistené, že sedimentačné konštantu, a tým aj molekulová hmotnosť a rozmery mRNA kódujúce H a L-hodnota vopred vysoko nad očakávalo. MRNA sedimentačnej konštanty pre H reťazcov definovaný hladký 12-17S (Namba, Hanaoka, 1969- Bernardini, Tonegawa, 1973- Cowan ea, 1976), a pre L-mRNA -12- 15S (Tonegawa, Baldi, 1973- Mach ea, 1973- Schechter ea, 1976).

príslušne Molekulovej hmotnosti týchto mRNA až 440 000 v prípade, že L-mRNA, skôr než 220,000, ako sa predtým myslelo, a 650 000, a nie na 400000 H-mRNA. Počet nukleotidov v mRNA L-1100-1250, a v H-mRNA -1900.

To sa dá ľahko spočítať, že pre syntézu L-reťazec skladajúci sa z 214 aminokyselinových zvyškov vyžaduje len ~ 650 nukleotidov (m. A. 220000). Pre syntézu prekurzora obsahujúceho ďalších 20 NH 2-terminálny a COOH-terminálny 25 aminokyselinových zvyškov, potrebné pre ďalších 60 a 75 nukleotidov (m. A. 45000). Celková syntéza prekurzoru pre L-reťazec 785 nukleotidov, je dostatočná, tj. F ~ 65% všetkých dostupných mRNA.

podobne pre syntézu H-reťazca, skladajúci sa z 450 aminokyselín, je požadované nukleotidy 1350 a v H-mRNA, ako sme videli, je súčasťou 1900. To znamená, že počet nukleotidov a bonusov je v tomto prípade 650. Ako sú "nepoužitý" 30% nukleotidov, a kde sa nachádzajú aká je ich funkcia?

Štúdia štruktúry oboch mRNA, kódujúci L reťazec (Brownlee e. a., 1973- Faust e. a., 1974), a jeden mRNA kódujúce H reťazec (Vegpag-Dini, Tonegawa, 1973, 1974) ukázala, že 200 nukleotidov (m. . 65000) v týchto mRNA tvorili póly sekvencie nachádzajúce sa na 3`-konci molekuly. Ich funkcia je stále nejasná. Je zrejmé len to, že, pretože poly-nukleotidy nachádzajú vo všetkých doteraz študovaných, mRNA kódujúce syntézu bielkovín ako viazaných a voľných polyribosomes (Rosenfeld napr. A., 1972), osobitného vzťahu k syntéze vylučovaných proteínov všeobecne, a imunoglobulíny sú najmä nemajú.

Je známe, že poly-end Spája molekuly mRNA po ukončení jeho syntézy. Predpokladá sa, že namiesto poly hrá úlohu v transporte mRNA z jadra do cytoplazmy, ale prítomnosť poly-fáza vo vírusovom genóme sa replikuje v cytoplazme znamená, že poly-nukleotidy musí byť, a ďalšie funkcie. Je možné, že namiesto póly je nutné zmeniť sekundárne a terciárne štruktúry mRNA a zvýšenie jej stability alebo viazať sa na mRNA poliribosomami- snáď hrajú úlohu v translácia mRNA, aj keď to nie je jasne preukázané, (Rosenfeld napr. A., 1972).
Tiež 200 nukleotidov, vzťahujúce sa k podielu poly miesto v L-200 mRNA zostáva nukleotidy neprenáša a známe, kde sa nachádza.

L-mRNA tsepevoy od MOPC boli v poslednej dobe zistené, 41 bunky menšie množstvo methylguanosine a N6-N7-methylguanosine byť umiestnený na 5'konca a je spojený s priľahlými nukleotidy 5', 5'-pyrofosfátu väzby. Teraz je známe, že prítomnosť zvyšku na metilguanidilovogo 5'-konci je nutné pre stabilizáciu a transláciu mRNA v eukaryoty.

Videá: 44 - genetického kódu kodóny Trioly); synonymá

údaje o dešifrovanie štruktúra mRNA sú predbežné. Podľa autorov, nepresne určená rozmery na 5'netranslatované oblasti, zatiaľ čo iba neskoré mRNA 194 nukleotidy boli schopné "atribút" pole kódovaný proteín reťazec skladajúci sa z 75 aminokyselín (z 214 v celom L-reťazec).

podobná práca To bolo vykonané s mRNA, kódujúce H reťazec MOPC 21 (Cowan e. a., 1976). Pomocou jedného z mutantov MOPC 21 Syntéza H-reťazca CH1 domény delécie, takže dekódovanie 18 oligonukleotidov, ktoré obsahujú základňu 202 a ktoré patrí aj V-, a C-domény. H-mRNA bola tiež detekovaná a poliA- nepreložené nukleotidov.

Je potrebné poznamenať, že základná hodnota výsledok, vyrába v týchto pokusoch, je stále ešte v tom, že majú konečne vyriešený problém syntézy H- a L-tsepsy ako celku, a na skutočnosti zlúčiť informácie o štruktúre V- a C-domény na úrovni DNA, by L-mRNA nielen pre identifikáciu nukleotidovej sekvencie kódujúce V- a C-domény a ukázať, že sú na rovnakej molekule, ale aj zvýrazniť zvyšky kódujúci oligonukleotid, 105-108, t. j. na kĺb V- a C-domény.
Ako sme videli vyššie, podobné výsledky boli získané s použitím iného prístupu je na molekulárnej úrovni.

Okrem toho v prospech fúzie Klinové a C-gény na úrovni DNA a čítanie informácií už obsiahnutých v týchto génov ako jediného génu, experimenty ukazujú, somatické hybridný bunky produkujúce imunoglobulíny sa líšia v ich V- a C-domény (Margulies napr. a., 1977- Milstein e. a., 1977) , V žiadnom z týchto experimentoch nebola pozorovaná tvorba molekúl rekombinaptnyh obsahujúce V-oblasť kódovaného jedným partnerom a C oblasti kódovaného ostatnými.