Syntéza imunoglobulínu ťažkého a ľahkého reťazca. Jednotná syntéza ťažkých a ľahkých reťazcov protilátok

Konkrétne štúdie z týchto otázok sa vykonáva pokusy s bunkami lymfatické uzliny imunizovaných králikov (Fleischman, 1967) a myší myelómové bunky (Knopf napr. A., 1967), pul-začne značí značka aminokyselina. Po premenlivých doby inkubácie buniek s 3H-leucínu sa izolujú H reťazec, sa štiepi na fragmenty (v prípade Brómkyán králičieho imunoglobulínu s papaínom alebo v prípade myelómu imunoglobulínu) a rádioaktivita sa určí pomerom týchto fragmentov.

Bolo preukázané, že pomer rádioaktivity NH 2-terminálny fragment (FD) a COOH-terminálny fragment (Fc), je 1-2 minúte nedvíha relatívne nízka, zvyšuje na 80% po 8 minútach. Podobné výsledky boli získané pri porovnaní aktivity NH2- a COOH-terminálny peptidy králičieho H reťazcov. Pozorovaná rozloženie impulzov štítku v molekule syntézy H reťazec zodpovedá predpokladu jednej zo svojho východiskového bodu.

V tomto prípade, v prvom rade by mali byť označené dostraivalos obvodu časti, t. j. peptidy COOH kontsa- postupne rádioaktivita NH2- a COOH-terminálny peptidy, ktoré majú byť vyrovnané, ako sa zistilo pri pokusoch.

Údaje podporujúce hypotézu syntéza každého reťaze ako celok boli získané v štúdiách podobné metódy syntézy H- a L-reťazca do bezbuněčného systému (Vassalli e. a., 1971). [Je potrebné poznamenať, že tento záver nie je isté. To znamená, že pozorované nerovnomerná distribúcia štítku môže byť vysvetlený tým, za predpokladu, že bunka má malý fond V-oblasti COOH-terminálny oblasti, ktorý sa rýchlo spája s NH2-konca pripojené k polyribosomes C oblasti.

Takáto možnosť je, najmä, To vyplývala z Schubert a Cohn experimentova ktorý našiel v myelómových bunkách polky syntézu L-reťazca (Schubert, Cohn, 1970). Avšak, údaje o mimoriadnej ľahkosťou hydrolýzy väzby na L-reťazec pôsobením proteolytických enzýmov (Solomon, McLaughlin, 1969), a to aj v prítomnosti slabej kyseliny (Fraser napr. A., 1972) ukazujú, že pozorovaná skôr rozpadu L-reťazca v týchto experimentoch, než jeho syntéza oboch polovíc].

V posledných rokoch sa produkcia zahájenie syntézy H- a L reťazca z jedného miesta potvrdzuje rad nepriamych údajov. Tie zahŕňajú detekciu krvi u pacientov s mnohopočetným myelómom a moču s "chybné" H reťazca konzervačné iba 17-18 HN2-terminálu, ale viac ako 200 COOH-terminálne aminokyselín (Frangione, 1976). Tak, v týchto obvodoch 100 zvyškami chýba VH oblasť 100 zvyškov a S-oblasť. Je neuveriteľné, že obe delécie došlo pred spojením V- a C-gény kódujúce H-reťazca, v každej z nich samostatne.
Preto je prítomnosť takejto "chybný, H-reťazca potvrdzuje predpoklad ich syntéze ako celku z jedného východiskového bodu.

Ďalším argumentom je, detekcia iniciačného metionínu iba na NH2-konci prekurzorov L-reťazca (Schechter, Burstein, 1976), a v neprítomnosti metionylový zvyškov 107-109 polohách L-reťazca (Wu, Kabát, 1970).

Konečne, dáta môžu viesť k potvrdenie tohto názoru, na veľkosti mRNA, kódujúce syntézu H- a L reťazca odvodené v posledných rokoch, je prítomnosť týchto mRNA do nukleotidov zodpovedajúcich aminokyselinových sekvencií, ako V-, a C-oblasti H- a L-reťazca, a možnosť izolácie mRNA kódujúce L reťazec z polyribosomes protilátky špecificky sa vyzráža ako V-, a na C-domény (Schechter, 1974b).