Kombinovaná gen diagnostika ochorení. Biochemické metódy v prenatálnu diagnostiku.

V niektorých prípadoch (žiadne alebo čiastočné informatívny) DNA diagnostika niektorých chorôb To môže byť doplnená ďalšími diagnostické štúdie. V prípade hemofílie A určia priamo hladinu faktora VIII zrážania fetálnej pupočníkovej krvi po 20 týždňoch tehotenstva. DNA diagnostika môže adrenogenitálny syndróm doplnená bp priame obsah vyšetrovania 17-OH progesterónu v plodovej vode (AF). PD fragilného X chromozómu sú často doplnené priamym cytogenetickej analýzy pupočníkovej krvi lymfocytárnej kultúre diagnostike fetálny DNA DMD v zásade to môže byť doplnené imunocytochémia fetálnych biopsiou kostrového svalstva.

V prípade Cystická fibróza viac informácií klbka môžu byť získané biochemickou analýzu aktivity enzýmu AF v 17-19 týždňoch tehotenstva. Rozvinutý a široko používané v našom laboratóriu algoritme PD cystickou fibrózou je znázornené na obrázku.

Biochemické metódy v prenatálnej diagnostiky

nevyhnutný obmedzenia biochemické metódy v PD je dobre známa skutočnosť, že funkčný stav, ktorý môže byť rozhodca alebo iný orgán, plodu alebo systém až po pôrode, keď skončí proces terminálny diferenciácie buniek špecializovaných tkanív, na jednej strane, a ak je ukončenie hovoru plod tele matky, ktorá zaisťuje trofické a základné metabolické procesy ovocie, - na strane druhej. Tento nedostatok zbavená diskutované skôr cytogenetických a molekulárnych metód PD. Avšak, biochemické a niektoré ďalšie výskumné metódy v niektorých prípadoch ukázať ako užitočné pri PD systému, ale hrať podpornú úlohu častejšie. Nemôžeme však vylúčiť, že aspoň o to viac hlboké znalosti funkcie génu, skreslil počet zbrusu nový, identifikovaný v procese implementácie programu "Human Genome", bude úloha biochemických metód PD zvyšovať.

najčastejšie materiál pre biochemické štúdie V PD FS sa získa amniocentézy. AJ je tvorený sekrečnú aktivitou amnion buniek v skorej embryonálnej fázach vývoja, a na úkor primárneho plodu moču - neskôr. Kvantitatívne a kvalitatívne zloženie plodovej vody je regulovaný zložiek systému amnion - matka - plod- porušením niektorého z nich vedie k prebytku alebo nedostatku vody, má vplyv na biochemické a bunkové kompozície AF.

rysy biochemických a bunkových zloženie AJ v rôznych fázach tehotenstva podrobne popísané v zvláštnych správ a názorov.

Video: Genetický skríning tehotných žien

Bunky v kvapalnom amnioticheskoi biochemické metódy

Bunky používa AF a to nielen v PD pre cytogenetickou analýzou, ale aj pre detekciu niektorých metabolických chorôb spojených s metabolickými defektmi. AF neobrábaných bunky môžu byť použité pre niektoré dedičných PD metabolické vady (NDO) pri použití histochemické a elektrónovej mikroskopie techniky majú špecifické dutinky, ktoré sú typické pre mnohých ochorení skladovanie. Takéto spôsoby sú opísané pre PD GSD II pred tým, než diagnostika DNA dlhá kultivačné bunky AF bola hlavným predmetom PD NDO.

Hlavnou podmienkou pre úspešné PD NDO - presný údaj o primárnej biochemické defektu je základom ochorenia. Väčšina NDO sa dedí autozomálne recesívnym spôsobom, v ktorom sú obaja rodičia heterozygotná nositeľmi mutovaného génu, a 25% pravdepodobnosť, môže mať chorých detí.

biochemický skríning v heterozygotná nosič pre väčšinu NGO nie je možné z dôvodu nedostatku koncentrácie stredných hodnôt študovaných proteínov sú normálne. Molekulárna screening ekonomicky neodôvodnené, s výnimkou niektorých malých etnických skupín, v ktorých špecifické mutácie frekvenciu podstatne vyššia ako u všeobecnej populácie. Príklady sú gangliosidóza typ GM2 IV-Židov ashke-nacistický, lysozomálnej ochorenia, ako je sialido z galaktosialidoza a ktoré sú častejšie u japonských a Taliani.

Pre presné PD NDO nedostatočná znalosť klinickou diagnózou. Aj s dobre preskúmaných príznakov ochorenia, ako je počet a glikolipidozov mukopolysacharidóza, existujú rozdiely v dôsledku odlišnej primárnej biochemického defektu. Príklad biochemické heterogenity je vyjadrená GSD I. typu I prebehnúť Avyzvan glukóza-6-fosfatázy, zatiaľ čo keď je typu B a C tohto ochorenia dysfunkcie na nahradenie iných enzymatických proteínov, ktoré sú nevyhnutné pre normálnu metabolizmus glukózy-6-fosfatázy, a to špecifické translokáza. Keď je táto aktivita enzýmu študoval jeden z rodičov, môže byť buď v podstate nad alebo pod priemerom, a sotva sa líši od úrovne určenej z pacienta. Také psevdonedostatochnost popísané, najmä pre Globoidní leukodystrofii.

Taká variabilita podstatne znižuje účinnosť PD biochemické metódy. Pre úspešné PD v týchto prípadoch, najmä dôležité informácie o defektného enzýmu alebo proteínové expresie v rôznych tkanivách. Táto informácia určuje výber optimálneho objektu PD biologické. Primárne biochemický defekt študovaná v rôznych tkanivách len pre určité skupiny enzýmov (napríklad lysozomálnej hydrolázy). Ďalej je známe, že aktivita mnohých enzýmov sa môže meniť v rôznych bunkových tkanivách v pre- a postnatálnom období.

Metódy stanovenia Biochemická porucha zvyčajne spojené buď s hodnotením aktivity enzýmu alebo identifikáciu iných proteínov podieľajúcich sa na enzymatické reakcie, alebo sa niektoré výrobky, ktoré sa hromadia v dôsledku enzymatického bloku. V rade špeciálnych edíciách nájdete podrobný opis diagnostických metódach, ako dlho známa a relatívne nedávno vyvinuté.

Hlavnými dedičných chorôb, pre ktoré PD je možné na základe biochemické štúdie AF AF bunky alebo kompozície sú uvedené v tabuľke.

Video: Aký je skríning. Liečebňa pre skríning

každý z nozologických orgány uvedené choroby zodpovedá primárne biochemického defektu, teda Narušenie z odkazu metabolizmu a objasnenie, z ktorých je hlavnou úlohou biochemické diagnostiky.

Vzhľadom k rýchlemu hromadeniu poznatkov o ľudskom genóme, identifikácia nových génov, štúdie mutácií a polymorfizmov, na jednej strane, zložitosť a neistoty často biochemické výsledky neprístupnosťou špecifické substráty - s ďalšie diagnostiky rastúcim počtom dedičných metabolických porúch sa vykonáva pomocou viac univerzálna a presné metódy molekulárnej analýzy. Zoznam NGO, ktoré sa vyvíjali molekulárnej diagnostické metódy sú uvedené v monografii VN Gorbunova a B. C. Baranova.

Avšak, niektoré proteíny AF, najmä tak zvané embriospetsificheskie proteíny, tj, Proteíny špecifické pre plod a nie sú zvyčajne syntetizované v matke udržať veľkú diagnostickú hodnotu. Tieto proteíny je potrebné najprv zahŕňať alfa-fetoproteínu (AFP), acetylcholínesterázy, plodu črevnej mikroklkov proteínov a steroidné hormóny.